タンパク質架橋反応を担う酵素群の最小基質配列の解明と活用

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19580103
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用生物化学
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 人見 清隆 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 准教授 (00202276)
• 連携研究者: 山西 清文 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (10182586)
• 研究協力者: 杉村 禎昭 名古屋大学大学院生命農学研究科, 博士後期課程学生, 学術振興会特別研究(DC1)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• キーワード: トランスグルタミナーゼ / タンパク質架橋反応 / 酵素 / 最小基質

研究概要

タンパク質架橋酵素であるトランスグルタミナーゼは、高等動物では8つのアイソザイムが多彩な生命現象に関わる。反応においては基質中の特定のグルタミン残基を酵素が認識する。こうしたグルタミン残基を含む最小基質としてのペプチド配列を、ファージ提示型ライブラリを用い、皮膚特異的酵素や産業利用されている放線菌由来酵素について解明した。最小基質配列に相当するペプチドを用い、高感度な酵素活性検出系の確立や有用な機能タンパク質の固相化などの応用的展開も行った。

研究成果

• [雑誌論文] Development of an isoenzyme-specific colorimetric assay for TGase 2 cross-linking activity (2009)
  • 著者名/発表者名: Alea. M., Kitamura M., Thomas V., Martin, G., Hitomi, K., Alaoui, S
  • 雑誌名: Anal. Biochem 389 ページ: 150-156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of the preferred substrate sequences for tissue-type transglutaminase (2009)
  • 著者名/発表者名: Hitomi, K., Kitamura, M., Sugimura,Y
  • 雑誌名: Amino Acids 36 ページ: 619-624
  • 査読あり
• [雑誌論文] Colocalization of cystatin M/E and its target proteases suggests a role in terminal differentiation of human nail and hair follicle (2009)
  • 著者名/発表者名: Cheng T., Ivonne MJJ, van Vlijmen-Willems, Hitomi K, Pasch MC, PEJ van Erp, Schalkwijk, J., and Zeeuwen, P.
  • 雑誌名: J Invest. Dermatol 129 ページ: 1232-1242
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of preferred substrate sequences for transglutaminase 1 : development of a novel peptide that can efficiently detect cross-linking enzyme activity in the skin (2008)
  • 著者名/発表者名: Sugimura, Y., HosonoM., Yamanishi K., Tsuda T., Maki M., Hitomi K
  • 雑誌名: FEBS J. 278 ページ: 5667-5677
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of the preferred substrate sequences of microbial transglutaminase from Streptomyces mobaraensis using a phage-displayed peptide library (2008)
  • 著者名/発表者名: Sugimura, Y., Yokoyama, K., Nio, N., Maki M., Hitomi K.
  • 雑誌名: Archives. Biophy. Biochem 477 ページ: 379-383
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transglutaminase 2 activity promotes membrane resealing upon mechanical damages in a lung cancer cell line A549 (2008)
  • 著者名/発表者名: Kawai Y., Wada, F., SugimuraY., Maki, M., Hitomi. K
  • 雑誌名: Cell Biology International 32 ページ: 928-934
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human calpain 7/PalBH associates with a subset of ESCRT-III-related proteins in its N-terminal region and partly localizes to endocytic membrane compartments (2007)
  • 著者名/発表者名: Yorikawa, C., Takaya E., Shibata, H., Shibata, H., Hitomi, K., Maki, M
  • 雑誌名: J. Biochem 143 ページ: 731-735
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of substrates for transglutaminase in Physarum polycehalum, an acellualr slime mold, upon cellular mechanical damage (2007)
  • 著者名/発表者名: Wada, F., Hasegawa, H., Nakamura A., Sugimura, Y., Sasaki, N., Shibata, H., Maki, M., Hitomi, K.
  • 雑誌名: FEBS J 274 ページ: 2766-2777
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel site-specific immobilization of functional protein using a preferred substrate sequence for transglutaminase 2 (2007)
  • 著者名/発表者名: Sugimura, Y., Ueda, M., Maki, M. Hitomi, K
  • 雑誌名: J. Biotechnol 131 ページ: 121-127
  • 査読あり
• [学会発表] 骨芽細胞におけるトランスグルタミナーゼの発現と基質解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 角田佳奈子、眞海喬生、渡辺一哉、杉村禎昭、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-03-29
• [学会発表] 皮膚型トランスグルタミナーゼの高反応性基質ペプチドを用いたin situ酵素活性の新規検出法 (2008)
  • 著者名/発表者名: 杉村禎昭、細野真代、北村三矢子、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 国際生化学会分子生物学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-09
• [学会発表] タンパク質架橋酵素 : トランスグルタミナーゼの反応機構と応用 (2008)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2008-03-29
• [学会発表] 放線菌由来トランスグルタミナーゼに対する高反応性基質配列の同定と解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 杉村禎昭、細野真代、横山慶一、丹尾希、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2008-03-28
• [学会発表] Identification and characterization of the preferred substrate sequences for transglutaminases. (2007)
  • 著者名/発表者名: 人見清隆
  • 学会等名: 国際生化学会分子生物学会大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-12
• [学会発表] 皮膚特異的トランスグルタミナーゼ(TGase 1)の高反応性基質配列の同定 (2007)
  • 著者名/発表者名: 細野真代、杉村禎昭、北村三矢子、山下博之、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 国際生化学会分子生物学会大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-11
• [学会発表] 微生物型トランスグルタミナーゼに対する高反応性器質配列の探索と解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 杉村禎昭、細野真代、横山慶一、丹尾希、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 国際生化学会分子生物学会大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-11
• [学会発表] タンパク質架橋酵素反応は動物細胞での物理的傷害の修復に必要である (2007)
  • 著者名/発表者名: 河合良樹、和田文孝、杉村禎昭、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 国際生化学会分子生物学会大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-11
• [学会発表] 皮膚特異的トランスグルタミナーゼ(TGase 1)の高反応性基質配列の同定 (2007)
  • 著者名/発表者名: 細野真代、杉村禎昭、北村三矢子、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会関西中部合同支部例会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 2007-09-12
• [学会発表] トランスグルタミナーゼは動物細胞での物理的傷害の修復に必要である (2007)
  • 著者名/発表者名: 河合良樹、和田文孝、柴田秀樹、牧正敏、人見清隆
  • 学会等名: 日本農芸化学会関西中部合同支部例会
  • 発表場所: 愛知
  • 年月日: 2007-09-12
• [学会発表] Identification of the preferred substrate sequences for transglutaminases using phage-displayed peptide library (2007)
  • 著者名/発表者名: Hitomi K., Sugimura, Y., Hosono M., Kitamura, M., Maki M
  • 学会等名: 9^<th> International Conference on Transglutaminase and Protein cross-linking
  • 発表場所: Morocco
  • 年月日: 2007-09-02
• [学会発表] Analysis for the substrate preference of keratinocyte transglutaminase(TGase 1)using phage-displayed peptide library (2007)
  • 著者名/発表者名: Sugimura Y., Hosono M., Kitamura, M., Maki M., Hitomi K.
  • 学会等名: 9^<th> International Conference on Transglutaminase and Protein cross-linking
  • 発表場所: Morocco
  • 年月日: 2007-09-02