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2008 年度 実績報告書

木材腐朽に関与する新規糖タンパク質の分子生物学的解析と環境汚染物質分解への利用

研究課題

研究課題/領域番号 19580196
研究機関近畿大学

研究代表者

田中 裕美  近畿大学, 農学部, 教授 (30140338)

研究分担者 榎 章郎  近畿大学, 農学部, 教授 (80027169)
キーワード白色腐朽菌 / 水酸化ラジカル / Phanerochaete chrysosporium / 木材腐朽 / 糖タンパク質
研究概要

木材を分解する腐朽菌はその腐朽形態に関わらず、木材を分解する際に菌体外に2価の鉄を含む糖タンパク質を分泌し、その物質によって生成される水酸化ラジカルが関与していることを明らかにしてきた。そして、白色腐朽担子菌ではこの水酸化ラジカルと、他の木材成分分解酵素との協奏的作用で木材構成成分の全てを分解する。昨年までの実験により、強力なリグニン分解菌である白色腐朽菌Phanerochaete chrysosporiumから水酸化ラジカル生成物質のタンパク質部分をコードする遺伝子glp1およびglp2を得た。さらに、glp1に関しては、5'末端および3'末端の非翻訳領域を解析し、転写開始点および2つの異なる転写終結点を解析できた。Glp2に関しては3'末端は解析できたが、5'末端については引き続き解析中である。またglp1遺伝子を大腸菌に組み換え、タンパク質を発現させるために、pET-32 Xa/LICベクター系を用いた。その結果、発現は確認出来たが、発現させたタンパク質を精製するのが困難であることが判明した。すなわち、使用する酵素が誤消化を起こす可能性やその後の精製段階でかなり長時間を必要とすることがわかった。そのため、BIO-RAD社の新製品であるProfinity eXact Fusion-Tag Systemを使用し発現を試みているが、引き続き詳細な発現条件の検討が必要である。さらにこの物質を用いた環境汚染物質の分解法の確立のために、モデル化合物を用いて分解実験を行ったが、モデル化合物が水溶性でないものは反応が進行しにくく、実験条件の検討が必要である。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2009 2008

すべて 学会発表 (3件)

  • [学会発表] 白色腐朽菌Ceriporiopsis subvermisporaが分泌する糖タンパク質の物理化学的性質について2009

    • 著者名/発表者名
      井上夕樹
    • 学会等名
      第59回日本木材学会大会
    • 発表場所
      松本大学
    • 年月日
      2009-03-15
  • [学会発表] 軟腐朽菌Graphium sp. ラッカーゼの分離・精製および物理化学的性質2009

    • 著者名/発表者名
      本田克樹
    • 学会等名
      第59回日本木材学会大会
    • 発表場所
      松本大学
    • 年月日
      2009-03-15
  • [学会発表] Characterization of a hydroxyl-radical-producing glycoprotein from the brown-rot basidiomycete Gloeophyllum trabeum2008

    • 著者名/発表者名
      Akio Enoki
    • 学会等名
      The 39^<th> Annual Meeting of The International Research Group on Wood Preservation
    • 発表場所
      The Military Museum (Istanbul, TURKEY)
    • 年月日
      2008-05-27

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公開日: 2010-06-11   更新日: 2016-04-21  

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