アグロバクテリウムを用いた海産プランクトンへの高効率な遺伝子導入法の開発

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19580206
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 水産学一般
• 研究機関: 高知大学
• 研究代表者: 足立 真佐雄 高知大学, 教育研究部・自然科学系, 教授 (70274363)
• 研究分担者: 大西 浩平 高知大学, 教育研究部・総合科学系, 教授 (50211800)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• キーワード: プランクトン / 遺伝子導入

研究概要

本研究では、まず海産プランクトンに対し、様々な条件の下でアグロバクテリウムを感染させ、その遺伝子導入を試みたが、形質転換体を得ることは出来なかった。そこで、海産藻類感染性ウイルスに由来するプロモーターを新たに用い、これを組み込んだ形質転換用プラスミドを構築した。本プラスミドを用いることにより、中心目珪藻種や羽状目珪藻種に対し、目レベルを超えて形質転換が可能であることが判明した。本結果は、海産藻類ウイルス由来のプロモーターの形質転換系への適用事例として、世界初の成果である。

研究成果

• [雑誌論文] High efficiency transformation of the diatom Phaeodactylum tricornutum with a promoter from the diatom Cylindrotheca fusiformis (2009)
  • 著者名/発表者名: Miyagawa A., Okami T., Kira N., Yamaguchi H., Ohnishi K. and Adachi M.
  • 雑誌名: Phycological Research 57 ページ: 142-146
  • 査読あり
• [雑誌論文] The pleiotropic regulator PhcA negatively controls expression of the first component of a regulatory cascade necessary for Ralstonia solanacearum hrp regulon induction (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshimochi T., Hikichi Y., Kiba A. and Ohnishi K.
  • 雑誌名: J.Bacteriol (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Occurrence of toxic Dinophysis acuminata (Dinophyceae) in Uranouchi Inlet, Japan (2008)
  • 著者名/発表者名: Adachi M., Okamoto N., Matsubara M., Nishijima T. and Suzuki T.
  • 雑誌名: Fisheries Science 74 ページ: 1351-1321
  • 査読あり
• [雑誌論文] The hrp genes of Pseudomonas cichorii are essential for pathogenicity on eggplant but not on lettuce (2008)
  • 著者名/発表者名: Hojo H., Koyanagi M., Tanaka M., Kajihara S., Ohnishi K., Kiba A. and Hikichi Y.
  • 雑誌名: Microbiology 154 ページ: 2920-2928
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystal structure of pyridoxamine-pyruvate amino-transferase from Mesorhizobium loti MAFF303099 (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshikane Y., Yokochi N., Yamasaki M., Mizutani K., Ohnishi K., Mikami B., Hayashi H. and Yagi T.
  • 雑誌名: J.Biol. Chem. 283 ページ: 1120-1127
  • 査読あり
• [学会発表] Development of marine diatom transformation system using viral promoter (2009)
  • 著者名/発表者名: Arisa Miyagawa, Yuji Tomaru, Keizo Nagasaki, Haruo Yamaguchi and Masao Adachi
  • 学会等名: SCOR Viral Ecology Meeting, Poster Presentation
  • 発表場所: Newark, USA
  • 年月日: 20090517-21
• [学会発表] 藻類感染性ウイルスプロモーターを用いた海産珪藻の形質転換系の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮川亜利沙・外丸祐司・長崎慶三・山口晴生・足立真佐雄
  • 学会等名: 第12回マリンバイオテクノロジー学会
  • 発表場所: 早稲田大学大久保キャンパス
  • 年月日: 2009-05-31
• [学会発表] The genus Ostreopsis in the coastal regions in Tosa Bay, southern part of Japan (2008)
  • 著者名/発表者名: Masao Adachi, Takuji Ikegami, Haruo Yamaguchi
  • 学会等名: The 13th International Conference on Harmful Algae, Poster Presentation
  • 発表場所: The Hong Kong Disneyland Hotel, Hong Kong, China
  • 年月日: 20081103-07
• [学会発表] Stable nuclear transformation of the diatom Chaetoceros sp. (2008)
  • 著者名/発表者名: Arisa Miyagawa, Haruo Yamaguchi and Masao Adachi
  • 学会等名: The 8th Asia-Pacific Marine Biotechnology Conference, Poster Presentation
  • 発表場所: Busan, Korea
  • 年月日: 20081013-15
• [産業財産権] 海産藻類を形質転換するために用いられる新規プロモーター (2009)
  • 発明者名: 足立真佐雄、長崎慶三、外丸裕司
  • 権利者名: 国立大学法人高知大学、独立行政法人水産総合研究センター
  • 産業財産権番号: 特願2009-013577
  • 出願年月日: 2009-01-23