鳥類顕微授精胚の発生研究

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19580325
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 島田 清司 名古屋大学, 生命農学研究科, 名誉教授 (40065579)
• 連携研究者: 小野 珠乙 信州大学, 農学部, 教授 (10177264)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• キーワード: 細胞内精子顕微注入(ICSI) / 精子由来卵子活性化因子 / phospholipase PLCζ / cRNA / 胚盤葉 / 外来遺伝子GFP / トランスジェニックウズラ

研究概要

非ウィルス法による鳥類トランスジェニック作出は、成功率が極めて低い。よって本研究は、細胞質内精子顕微注射法(Intracytoplasmic Sperm Injection, ICSI)による遺伝子導入法を試みた。外来遺伝子としてGreen Fluorescent Protein(GFP)を単一射出精子とPLCzeta cRNAと同時に注入し、ウズラ胚にGFPを発現させるた。pCX-E GFPプラスミドとPLCzeta cRNAをウズラ未受精卵に同時に顕微注入し、24時間の体外培養(System Q1a)と48時間の追加体外培養の結果、外来遺伝子GFPを胚盤葉で発現していることが観察できた。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of differentially expressed genes involved in the regression and development of Mullerian duct of chicken (2009)
  • 著者名/発表者名: Ha Y, Tsukada A, Saito N, Shimada K
  • 雑誌名: International Journal of Developmental Biology 52 ページ: 1135-1141
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expressionof P450arom, AMH and Erα mRNA in gonads of turkey, duck and goose within one week of age (2008)
  • 著者名/発表者名: Koba N, Ohfuji T, Ha Y, Mizushima S, Tsukada A, Saito N, Shimada K.
  • 雑誌名: Journal of Poultry Science 45 ページ: 215-219
  • 査読あり
• [雑誌論文] Developmental enhancement of intracytoplasmic sperm injection(ICSI)-generated quail embryos by phospholipase Cζ (2008)
  • 著者名/発表者名: Mizushima S, Takagi S, Ono T, Atsumi Y, Tsukada A, Saito N, Shimada K.
  • 雑誌名: Journal of Poultry Science 45 ページ: 152-158
  • 査読あり
• [雑誌論文] Profiles of mRNA expression of FOXL2, P450arom, DMRT1, AMH. P450c17, SF1, Era and AR, in relation to gonadal sex differentiation in duck embryo (2008)
  • 著者名/発表者名: Koba N, Ohfuji T, Ha Y, Mizushima S, Tsukada A, Saito N, Shimada K.
  • 雑誌名: Journal of Poultry Science 45 ページ: 132-138
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of aromatase inhibitor(Fadrozole)-induced sex-reversal on gonadal differentiation and mRNA expression of P450arom, AMH and Erα in quail embryos and growth in posthaching quail (2008)
  • 著者名/発表者名: Koba N, Mori M, Ha Y, Mizushima S, Tsukada A, Saito N, Shimada K
  • 雑誌名: Journal of Poultry Science 45 ページ: 116-124
  • 査読あり
• [雑誌論文] Possible role of calcium on oocyte development after intracytoplasmic sperm injection in quail(Coturnix japonica) (2008)
  • 著者名/発表者名: Mizushima S, Takagi S, Ono T, Atsumi Y, Tsukada A, Saito N, Shimada K
  • 雑誌名: Journal of Experimental Zoology 307 ページ: 647-53
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histocompatible chicken inbred lines : Homogeneities in the major histocompatibility complex antigens of the GSP, GSN/1, PNP/DO and BM-C inbred lines assessed by hemagglutination, mixed lymphocyte reaction and skin transplantation (2007)
  • 著者名/発表者名: Valdez Jr MB, Mizutani M, Fujihara A Yazawa H, Yamagata T, Shimada K, Namikawa T
  • 雑誌名: Experimental Animals 56 ページ: 329-338
  • 査読あり
• [雑誌論文] Z-chromosome specific primers for chicken-quail hybrid blastoderm (2007)
  • 著者名/発表者名: Takagi S, Ono T, Tsukada A, Atsumi Y, Mizushima S, Saito N, Shimada K.
  • 雑誌名: Journal of Poultry Science 44 ページ: 209-212
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fertilization and blastoderm development of quail oocytes after intracytoplasmic injection of chicken sperm bearing the W chromosome (2007)
  • 著者名/発表者名: Takagi S, Ono T, Tsukada A, Atsumi Y, Mizushima S, Saito N, Shimada K
  • 雑誌名: Poultry Science 86 ページ: 937-943
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fertilizing ability of chicken sperm bearing W chromosome (2007)
  • 著者名/発表者名: Takagi S, Tsukada A, Saito N, Shimada K.
  • 雑誌名: Poultry Science 86 ページ: 730-737
  • 査読あり
• [学会発表] ウズラ卵子DNase I活性に及ぼす精子数の効果 (2009)
  • 著者名/発表者名: 杉本宰甫、水島秀成、古寺敏子、島田清司、小野珠乙、木村一郎
  • 学会等名: 日本家禽学会
  • 発表場所: 藤沢市
  • 年月日: 2009-03-28
• [学会発表] 顕微授精ウズラ卵cRNA注入の効果 (2008)
  • 著者名/発表者名: 水島秀成、島田清司
  • 学会等名: 日本家禽学会
  • 発表場所: 水戸市
  • 年月日: 2008-03-28
• [学会発表] Profiles of mRNA expression of sex-differentiation-related genes in relation to gonadal sexual differentiation in duck (2007)
  • 著者名/発表者名: Naomi Koba, Shusei Mizushima, Akira Tsukada, Noboru Saito
  • 学会等名: APPC
  • 発表場所: Bangkok, Thailand
  • 年月日: 2007-02-06