下垂体前葉細胞の純化と細胞間相互作用研究への応用

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19590194
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 解剖学一般(含組織学・発生学)
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 屋代 隆 自治医科大学, 医学部, 教授 (80119859)
• 研究分担者: 菊地 元史 自治医科大学, 医学部, 准教授 (60332988) ; 滝上 周 自治医科大学, 医学部, 講師 (60333366) ; 藤原 研 自治医科大学, 医学部, 助教 (00382945) ; 堀口 幸太郎 自治医科大学, 医学部, 助教 (10409477)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• キーワード: 組織学

研究概要

ラット下垂体前葉では、特定の細胞間に接着親和性が存在し、例えば、LH/FSH分泌細胞とプロラクチン(PRL)分泌細胞、GH分泌細胞とACTH分泌細胞は、異種細胞間で高い接着親和性を示し、非ホルモン分泌性の濾胞星状細胞は、同種細胞間で接着親和性を示す。我々は、これまでの研究からこうした細胞間に、細胞接着を基とした情報伝達が存在すると考えている。これらの実態解明のために、下垂体前葉細胞を純化して研究を遂行することが必要であると考えた。その方法論として、レクチンを利用して、ホルモン産生細胞の細胞表面に細胞種ごとに特異的な糖鎖が存在していることを示し、これを応用して生きた細胞を蛍光標識・同定することを初めて可能とした。併せて、濾胞星状細胞特異的なプロモーター下にGFPを発現するトランスジェニック動物を用い、その下垂体からセルソーティング法により、濾胞星状細胞を純化することに成功した。これらの細胞を用いることにより、前葉内での局所的な細胞機能調節機構として、マトリクライン(細胞外基質の影響)、ジャクスタクライン(細胞接着因子の役割)、パラクライン(レチノイン酸合成酵素の局所的発現動態)の3つの概念をさらに具現化することが可能となった。

研究成果

• [雑誌論文] Living-cell imaging of transgenic rat anterior pituitary sells in primary culture reveals novel char acteristics of folliculo-stellate cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi, et al
  • 雑誌名: J Endocrinol. 204 ページ: 115-123
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of E-cadherin Expression on hormone production in rat anterior pituitary lactotrophs in vitro. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kusumoto, et al.
  • 雑誌名: Act. Histo 43 ページ: 83-88
  • 査読あり
• [雑誌論文] Estorogen receptor alpha regulates retinaldehyde dehyadrogenare 1 expres sion in trat anterior pituitary cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara, et al.
  • 雑誌名: Endocr J. 56 ページ: 963-973
  • 査読あり
• [雑誌論文] Spatio-temporal relation between cadherin switching and cytogenesis of hormone-producing cell in the developing rat adenohypophysis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, et al.
  • 雑誌名: Anat Sci Int. 84 ページ: 155-160
  • 査読あり
• [雑誌論文] Estrogen suppresses retinaldehyde dehydrogenase 1 expression in the anterior pituitary glands of female rats. (2008)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara K, Davaadash B, Kikuchi M, Takigam S, YashiroT.
  • 雑誌名: 55 ページ: 91-96
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reduction of retinaldehydedehydrogenase1 expression and production in estrogen-induced prolactinoma of rat. (2008)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara K, Davaadash B, Yatabe M, Kikuchi M, Horiguchi K, Kusumoto K, Kouki T, Yashiro T.
  • 雑誌名: Med Mol Morphol. 41 ページ: 126-131
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunohistochemistry of connexin 43 throughout anterior pituitary gland in a transgenic rat with green fluorescent protein-expressing folliculo-stellate cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Horiguchi K, Fujiwara K, Kouki T, Kikuchi M, Yashiro T.
  • 雑誌名: Anatomical Science International. 83 ページ: 256-260
  • 査読あり
• [雑誌論文] Estrogen suppresses retinaldehydedehydrogenase 1 expression in the anterior pituitary glands of female rats (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 雑誌名: Endocrine Journal 55 ページ: 91-96
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo correlation between c-Fos expression and corticotroph stimulation by adrenocorticotrophic hormone secretagogues in rat anterior pituitary gland (2008)
  • 著者名/発表者名: 瀧上周
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 331 ページ: 589-594
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of retinaldehyde dehydrogenase (RALDH)2 and RALDH3 but not RALDH1 in the developing anterior pituitary glands of rats (2007)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 328 ページ: 129-135
  • 査読あり
• [雑誌論文] Changes in E-and N-cadherin expression in developing rat adenohypophysis (2007)
  • 著者名/発表者名: 菊地元史
  • 雑誌名: Anatomical Record 290 ページ: 486-490
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of retinaldehyde dehydrogenase1 in the anterior pituitary glands of adult rats (2007)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 雑誌名: Cell and Tissue Research 329 ページ: 305-310
  • 査読あり
• [学会発表] ラット成体の腺下垂体にみられるE-カドヘリン陽性細胞の性質 (2010)
  • 著者名/発表者名: 菊地元史
  • 学会等名: 第115回日本解剖学会・学術集会
  • 発表場所: 盛岡
  • 年月日: 2010-03-28
• [学会発表] 発生過程のラット腺下垂体におけるレチノイン酸合成酵素(RALDH)発現細胞の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 学会等名: 第115回日本解剖学会・学術集会
  • 発表場所: 盛岡
  • 年月日: 2010-03-28
• [学会発表] ラミニンとの接着が下垂体専用内濾胞星状細胞に与える影響 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎
  • 学会等名: 第115回日本解剖学会・学術集会
  • 発表場所: 盛岡
  • 年月日: 2010-03-28
• [学会発表] ラット下垂体前葉細胞のホルモンと各種受容体遺伝子発現に対するレチノイン酸の作用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 学会等名: 第24回日本下垂体研究学学術集会
  • 発表場所: 青森
  • 年月日: 2009-08-28
• [学会発表] 下垂体現用細胞初代培養のliving観察によって示唆される濾胞星状細胞の新たな機能-特に細胞外マトリックスに注目して (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎
  • 学会等名: 第24回日本下垂体研究学学術集会
  • 発表場所: 青森
  • 年月日: 2009-08-28
• [学会発表] ラット下垂体前葉で発現するレチノアルデヒド脱水素酵素1はエストロゲンによりエストロゲン受容体αを介して抑制される (2009)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 学会等名: 第82回日本内分泌学会学術集会
  • 発表場所: 前橋
  • 年月日: 2009-04-25
• [学会発表] 細胞接着因子カドヘリンからみた腺下垂体細胞の発生・分化 (2009)
  • 著者名/発表者名: 菊地元史
  • 学会等名: 第82回日本内分泌学会学術集会
  • 発表場所: 前橋
  • 年月日: 2009-04-24
• [学会発表] 下垂体前葉組織構築に対する濾胞星状細胞の関与-インテグリンを介した細胞外マトリックスとの特異的親和性- (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎
  • 学会等名: 第82回日本内分泌学会学術集会
  • 発表場所: 前橋
  • 年月日: 2009-04-24
• [学会発表] パラクライン、ジャクスタクライン、マトリクラインによる新たな下垂体前葉細胞の機能調節機構の解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 屋代隆
  • 学会等名: 日本解剖学会第114回全国学術集会
  • 発表場所: 日岡山
  • 年月日: 2009-03-29
• [学会発表] エストロゲンはラット下垂体前葉でのretinaldehyde dehydrogenase 1(RALDH1)の発現を抑制する (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 学会等名: 第113回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • 発表場所: 大分
  • 年月日: 2008-03-29
• [学会発表] 下垂体前葉初代培養における濾胞星状細胞の動態観察と各種ホルモン産生細胞との位置的親和性の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎
  • 学会等名: 第113回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • 発表場所: 大分
  • 年月日: 2008-03-29
• [学会発表] 下垂体隆起部における濾胞星状細胞間Gap junction及びLHRHニューロンの共焦点レーザー顕微鏡による観察 (2007)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎
  • 学会等名: 第32回日本比較内分泌学会大会
  • 発表場所: 日光
  • 年月日: 2007-10-12
• [学会発表] 正常下垂体前葉細胞とプロラクチン産生腫瘍におけるレチノイン酸合成酵素の発現 (2007)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 学会等名: 第48回日本組織細胞化学会総会、第39回日本臨床分子形態学会総会合同学術集会(ワークショップ)
  • 発表場所: 甲府
  • 年月日: 2007-09-29
• [学会発表] 下垂体前葉における新たなパラクライン調節機構-成体ラット下垂体前葉でのレチノイン酸合成の存在- (2007)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 学会等名: 第23回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 葉山
  • 年月日: 2007-08-24
• [学会発表] トランスジェニックラットを用いた下垂体濾胞星状細胞間Gap junctionの共焦点レーザー顕微鏡による観察 (2007)
  • 著者名/発表者名: 堀口幸太郎
  • 学会等名: 第23回日本下垂体研究会
  • 発表場所: 葉山
  • 年月日: 2007-08-24
• [学会発表] 成体ラット下垂体前葉細胞におけるレチノイン酸合成酵素の発現 (2007)
  • 著者名/発表者名: 藤原研
  • 学会等名: 第34回日本神経内分泌学会
  • 発表場所: 前橋
  • 年月日: 2007-08-04
• [備考]
  • URL: http://www.jichi.ac.jp/histology/