|
カンナビノイド受容体の内因性リガンドとして見出されたアナンダミドを含む種々のN-アシルエタノールアミン(NAE)は、動物組織中で生体膜のグリセロリン脂質から2段階の酵素反応で合成される。この反応の第一段階を触媒するボスファチジルエタノールアミンN-アシル転移酵素の実体は依然として不明であるが、我々は、同じ反応を触媒する別酵素を発見し、Ca^<2+>-非依存性N-アシルトランスフェラーゼと名付けた。同酵素のcDNAをラット、マウス、ヒトからクローニングし、組換えタンパク質をCOS-7細胞で発現させたところ、いずれもCa^<2+>-非依存的に同反応を触媒した。また、構造類似タンパク質の間で高度に保存されているヒスチジン及びシステイン残基が触媒に必須であることや、N末端ドメインが膜との結合もしくはタンパク質間相互作用に関与する可能性を見出した。一方、NAEの分解については、遊離脂肪酸とエタノールアミンへの加水分解が主要経路であることがわかっている。我々が以前に発見したNAEを加水分解する酸性アミダーゼはリソソーム酵素のひとつであるが、その機能と発現分布についての検討を進めた。本酵素の至適pHは4.5前後であるが、グルタミン酸-195の変異によりpH依存性が変化することから、この残基がpH依存性の決定因子のひとつであることが示唆された。さらに、本酵素のペプチド鎖の限定分解による活性化が自己触媒的に生じることや、ヒトでは前立腺組織や前立腺がん細胞で強く発現していることを明らかにした。
|
