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2008 年度 実績報告書

姉妹染色体分体の分配を支配するPKU-β/TLK1の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 19590290
研究機関金沢医科大学

研究代表者

伊達 孝保  金沢医科大学, 付置研究所, 教授 (50019676)

研究分担者 尾崎 守  金沢医科大学, 付置研究所, 助教 (50319068)
キーワードPKU-beta / TLK1 / myosin II / MRLC / chromosome / segregation / contractile ring / centrosome / mitosis
研究概要

PKU-beta/TLK1の機能は細胞周期のS期だけでなくM期にも重要な働きをしていることをRNA干渉によるPKU-beta/TLK1ノックダウン細胞を用いて明らかにした。
1.TLK-beta/TLK1のノックダウンはmyosin II regulatory light chain (MRLC)のThr18/Ser19のリン酸化を低下させる.M期前期の正常細胞ではリン酸化MRLCは中心体に局在するがノックダウン細胞ではこれが見られず、中心体移動を妨げる原因と考えられた。
2.しかし、PKU-beta/TLK1のノックダウン細胞の半数以上はM期前期から後期に移行している。これらの細胞の分離した染色体分体の量は、DAPIの蛍光強度で比較してみると不均等であった。二つの染色分体のDNA比は、正常細胞で5%(45:55比)以内であるのに対し、ノックダウンのそれは5%以上、2:3比以上も多数見られた。
3.さらに、コントール細胞では細胞質分裂の収縮環にリン酸化MRLCが集積するが、ノックダウン細胞のミオシンは縮環に集積せず、収縮環形成不全を示した。
4.MRLCのリン酸化擬似体でThr18/Ser19をアスパラギン酸に置換したDD-MRLC発現プラスミドをノックダウン細胞へ導入すると、染色体不分離、不均等分裂のM期の障害が解消された。このことは、PKU-beta/TLK1がMRLCのリン酸化を制御しM期全体にわたり支配していることを示唆する。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2009 2008

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] PKU-beta/TLK1 regulates myosin II activities, and isrequired for accurate equaled chromosome segregation.2009

    • 著者名/発表者名
      Hashimoto M
    • 雑誌名

      Mutat Res 657

      ページ: 63-67

    • 査読あり
  • [学会発表] PKU-beta/TLK1 plays a dual role in both centrosome separation and chromosome segregation2008

    • 著者名/発表者名
      伊 達 孝 保
    • 学会等名
      33^<rd> FEBS Congress 11^<th> IUBMB Conference
    • 発表場所
      ギリシャ・アテネ
    • 年月日
      2008-06-28

URL: 

公開日: 2010-06-11   更新日: 2016-04-21  

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