| 研究概要 |
今年度の研究目的として「スネイル発現細胞は親株細胞に比べ細胞密度が低い状態で定常状態となりそのあと死に始めるがその細胞数を規定する分子機構は何か調べる」をあげた。これについて実施した研究成果ではスネイル発現MDCK細胞(MDCK/snail)は低濃度のグルコース(5.5mM)含有のDMEM培地で培養した場合48時間後から死に始めることを見出した。コントロールMDCK(MDCK/neo)では細胞死はおこらない。この細胞死は高濃度のグルコースを添加することにより回避できた。MDCK/snail細胞のグルコース消費や解糖系酵素の活性が亢進しているわけではなかった。一方MDCK/snail細胞のATP産生は顕著に低下していた。酸素消費はコントロール細胞に比べ低下しておりTCA回路、電子伝達系の酵素の活性も低下していた。その分子機構の解析を試みた。まずTCA回路、電子伝達系酵素の発現をRT-PCRで網羅的に調べたがMDCK/neo細胞,MDCK/snail細胞で差はみられなかった。次に活性酸素の産生を調べた。が、ミトコンドリア、細胞質における活性酸素の消費には差がなかった。また活性酸素を人工的に誘導した場合にもその産生量に差はなかった。TCA回路の酵素活性を低下させるものとして亜鉛が上げられる。細胞内亜鉛含量はMDCK/snail細胞で高く亜鉛のトランスポーターであるZnT3,ZnT8,ZIP8の発現が亢進していた。
意義、重要性としてMDCK/snail細胞は低濃度グルコースの条件で離脱することを示した。すなわちグルコース濃度の変化が接着、離脱と連関する可能性があることを示唆する。
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