リン酸化EGFR抗体を用いた肺癌のGefitinib感受性診断法の確立

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19590354
• 研究機関: 大分大学
• 研究代表者: 泥谷 直樹 大分大学, 医学部, 助教 (80305036)
• 研究分担者: 守山 正胤 大分大学, 医学部, 教授 (90239707)
• キーワード: 肺癌 / Gefitinib / リン酸化抗体 / EGFR / 感受性診断法

研究概要

我々は昨年度、Gefitinib感受性の肺癌組織では、EGFRの992番目のチロシン残基がリン酸化されていることを免疫組織化学的に明らかにした。この知見に基づき、感受性予測が正確、迅速かつ簡便に行える診断キットの開発を目指している。
1.マウス抗pEGFR Tyr992モノクローナル抗体の作製
pEGFR Tyr992を含む合成ペプチドでマウスを免疫して、ミエローマ細胞との細胞融合、ELISA法による1次スクリーニングを行い、有望な抗体産生細胞を数個獲得した。
2.マウス抗pEGFR Tyr992モノクローナル抗体の大量精製
抗体産生細胞を無血清培地にて大量培養し、培養上清を回収した。濃縮した後、プロテインGカラムを用いて、抗体を精製している。
3.ウサギ抗pEGFR Tyr992ポリクローナル抗体を作製・大量精製
マウスの免疫に用いたpEGFR Tyr992を含む合成ペプチドで、ウサギを免疫して、抗血清を採取した。これをアフィニティーカラムで精製して、抗体を得た。
現在、pEGFR Tyr992を特異的に認識するマウスモノクローナル抗体およびウサギポリクローナル抗体を用いてELISAのシステムを作成しているところである。

研究成果

• [雑誌論文] Evaluation of Rapid Urine Test for the Detection of Helicobacter pylori Infection in the Vietnamese Population. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nguyen LT, Uchida T, Tsukamoto Y, Trinh TD, Ta L, Ho DQ, Matsuhisa T, Uchida M, Takayama A, Hijiya N, Okimoto T, Kodama M, Murakami K, Fuiioka T, Moriyama M.
  • 雑誌名: Digestive diseases and sciences ページ: Epub ahead of print
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced phosphorylation of the epidermal growth factor receptor at the site oftyrosine992 in esophageal carcinomas. (2008)
  • 著者名/発表者名: Miyawaki M, Hijiya N, Tsukamoto Y, Nakada C, Kawahara K, Moriyama M.
  • 雑誌名: APMIS 116 ページ: 1097-1106
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genome-wide microRNA expression profiling in renal cell carcinoma : significant down-regulation of miR-141 and miR-200c. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakada C, Matsuura K, Tsukamoto Y, Tanigawa M, Yoshimoto T, Narimatsu T, Nguyen LT, Hiiiya N, Uchida T, Sato F, Mimata H, Seto M, Moriyama M.
  • 雑誌名: The Journal of pathology 216 ページ: 418-427
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genome-wide analysis of DNA copy number alterations and gene expression in gastric cancer. (2008)
  • 著者名/発表者名: Tsukamoto Y, Uchida T, Kaman S, Noguchi T, Nguyen LT, Tanigawa M, Takeuchi I, Matsuura K, Hijiya N, Nakada C, Kishida T, Kawahara K, Ito H, Murakami K, Fujioka T, Seto M, Moriyama M.
  • 雑誌名: The Journal of pathology 216 ページ: 471-82
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genotyping of the cagA gene of Helicobacter pylori on immunohistochemistry with East Asian CagA-specific antibody. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kanada R, Uchida T, Tsukamoto Y, Nguyen LT, Hijiya N. Matsuura K, Kodama M, Okimoto T, Murakami K, Fujioka T, Yanagisawa S, Moriyama M.
  • 雑誌名: Pathology International 58 ページ: 218-225
  • 査読あり
• [学会発表] 腎癌におけるmiRNAの網羅的発現解析(Genome-wide microRNA expression profiling in renal cell carcinoma) (2008)
  • 著者名/発表者名: 中田知里, 松浦恵子, 塚本善之, 谷川雅人, 吉本多一郎, 泥谷直樹, 内田智久, 三股浩光, 瀬戸加大, 守山正胤
  • 学会等名: 第67回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20081028-20081030
• [学会発表] 胃癌におけるゲノムコピー数異常と遺伝子発現異常の統合解析(Genome-wide analysis of DNA copy number alterations and gene expression in gastric cancer) (2008)
  • 著者名/発表者名: 塚本善之, 内田智久, カルナン・シバスンダラム, 野口剛, 谷川雅人, 竹内一郎, 松浦恵子, 中田知里, TungNguyen, 泥谷直樹, 井藤久雄, 瀬戸加大, 守山正胤
  • 学会等名: 第67回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20081028-20081030
• [備考]
  • URL: http://www.med.oita-u.ac.jp/daigakuin/fandamental/indexO2.html