| 研究概要 |
癌のテロメア調節機構におけるhnRNP A2/B1アイソフォーム蛋白(A2、B1、B0蛋白)の役割を明らかにすることを目的として、以下の検討をおこなった。
1)同調培養したHeLa細胞からA2、B1蛋白の免疫沈降し、A2蛋白とB1蛋白の蛋白寿命、分解の速度に違いがあることが明らかにした。これはB1蛋白特異的なN末端の12アミノ酸中の3個のリジン残基に関連したユビキチン化の違いによるもので、A2蛋白よりB1蛋白の発現が癌で亢進することに関連があると考えた。
2)精巣組織より蛋白標本を調整し、一本鎖テロメアDNAとの相互作用する蛋白をSouthwestern blotting法にて解析した。A2/B1蛋白が精巣の一本鎖テロメアDNA結合する主要な核蛋白であることを確認した。さらにge1-retardation分析により、B1蛋白特異的なN末端の12アミノ酸が、一本鎖テロメアDNAと特異的に結合することも明らかにした。
3)ALTのモデル細胞として副腎癌由来の細胞株H295Rの性状解析をおこなった結果、hnRNP A2/B1アイソフォーム蛋白のうちB1,B0蛋白を他の癌細胞株より豊富に発現していることが明らかになった。
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