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多種多様ながんにおいて高発現しているヒストン修飾を制御する分子であるEnhancer of zeste homologue 2(EZH2)が、腫瘍抑制遺伝子のような細胞の恒常性を維持するような重要な遺伝子群の発現の抑制をもたらすことにより、細胞の表現型を劇的に変化させ、がんの発生と進展を引き起こしているかについて明らかにすることが本研究の目的である。今年度については標的遺伝子を明らかにすることにより、がんの発生と進展のメカニズムに与える影響を検討し、実際のがん組織を用いて確認することにより治療標的分子として可能性を広げることが本研究の目的である。E-cadherinがEZH2の標的遺伝子のひとつであることを明らかにした。さらにEZH2が標的遺伝子の発現を抑制することによって、がん細胞の表現型への影響を与えるか否かについて検討を試みた。EZH2をノックダウンすることにより、E-cadherinの発現が回復し、結果としてtight membranous adhesionの回復によるがん細胞の浸潤能の低下を認めた。さらにE-cadherinとβ-cateninとの結合の回復を確認し、細胞増殖速度の低下を認めた。胃癌組織を用いた免疫組織学的な検討から、蛋白レベルでEZH2とE-cadherinとの間に逆の相関関係が存在することを見出した。前述のin vitroの結果が実際のがん組織のin vivoでも存在することを明らかにした。また、EZH2がクロマチンリモデリングを介して、遺伝子群の発現を抑制しているか否かについて検討を行った。結果は、EZH2をノックダウンすることにより、プロモーター領域のCpG islandのDNAメチル化状態に変化を伴わず、標的遺伝子の発現の回復を認めた。クロマチン免疫沈降法により、標的遺伝子の上流域にEZH2が結合することを確認し、結合の有無によってヒストンのメチル化状態即ちヒストン修飾状態が変動することを認めた。
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