クルーズトリパノソーマ原虫のシアン感受性新規キノール酸化酵素の解析

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19590434
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 鈴木 高史 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教 (70305530)
• キーワード: 末端酸化酵素 / トリパノソーマ原虫 / 増殖

研究概要

TcrAOX遺伝子のORF部分を組み込んだ発現ベクターを構築し、T.cruzi原虫昆虫型(epimastigote)細胞に導入し、強制発現を行った。その結果、コントロール細胞に比べて、数倍の増殖率増加が観察された。しかし、増殖の増加率が期待されたほど高くはなかったので、RT-PCRによりRNAレベルでの発現をコントロールと比較したところ上昇が見られたが、ウェスタンブロットによりタンパクレベルでの発現をコントロールと比較したところ若干の上昇しか見られなかった。そこで、タンパクレベルでの発現量を増加させるために、Internal ribosomal entry site (IRES)を組み込んだベクターを構築し、T.cruzi原虫昆虫型(epimastigote)細胞に導入し、強制発現を行ったところ、タンパクレベルでの発現が上昇し、細胞の増殖率もコントロール細胞と比較して10倍以上の増加が見られた。以上の結果より、本分子が細胞増殖に関して重要な機能を担っていることが推察された。
TcrAOXのノックアウト株を作製するために、TcrAOX遺伝子の上流、下流1000bpをクローニングし、ネオマイシン耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子を組み込んだ、ノックアウト株構築用ベクターを作製した。

研究成果

• [雑誌論文] Establishment of a polymerase chain reaction method for detection of Escherichia coli in amniotic fluid in patients with chorioamnionitis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Daoud GA, Suzuki Y, Yamamoto T, Suzuki T, Suzumori N, Tanemura M.
  • 雑誌名: Fetal Diagnosis and Therapy 24 ページ: 132--9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genome-scale Prioritization of Drug Targets : TDRtargets. org. (2008)
  • 著者名/発表者名: Aguero F, Berriman M, Buckner F, Campbell B, Carmona S, Crowther G, Hertz-Fowler C, Hopkins A, Al-Lazikani B, McAllister G, Nwaka S, Overington J, Pain A, Paolini G, Ralph S, Riechers A, Roos S D, Sali A, Shanmugam D, Suzuki T, Verlinde L C, Van Voorhis C W.
  • 雑誌名: Nature Reviews Drug Discovery 7 ページ: 1--8
  • 査読あり
• [学会発表] アフリカトリパノソーマ原虫の「動き」関連遺伝子の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 鈴木高史, 大島茂, 大橋光子, 籔義貞, 三浦裕
  • 学会等名: 第78回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 東京都 法政大学
  • 年月日: 2009-03-27