肝幹細胞を用いた幹細胞移植療法とC型肝炎ウイルス感染モデル動物の開発

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19590752
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 陳 正新 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助教 (10376783)
• 研究分担者: 柿沼 晴 東京大学, 医科学研究所, 特任助教・客員研究員 (30372444) ; 坂本 直哉 東京医科歯科大学, 医歯学総合研究科, 准教授 (10334418) ; 渡辺 守 東京医科歯科大学, 医歯学総合研究科, 教授 (10175127)
• 連携研究者: 坂本 直哉 東京医科歯科大学, 医歯学総合研究科, 准教授 (10334418) ; 渡辺 守 東京医科歯科大学, 医歯学総合研究科, 教授 (10175127)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• キーワード: 肝幹細胞 / C型肝炎ウイルス / 細胞移植 / FACS / shRNA / 肝細胞

研究概要

本研究において我々は、初代肝幹細胞を分離・培養し、これを利用して新規の細胞移植モデルをマウスにおいて確立すること、及びC型肝炎ウイルス(HCV)感染モデル動物の構築を行うことを目的として研究計画を遂行した。その結果、マウス肝幹細胞が高濃度に純化された画分を得る手法を確立し、その分化・増殖に制御する分子を数種類同定した。さらに、肝臓の約半分がドナー細胞によって置換される移植モデルの構築に成功した。そしてHCV感染動物に対する治療モデル系構築に成功し、研究計画を概ね達成した。

研究成果

• [雑誌論文] Analyses of cell surface molecules on hepatic stem/progenitor cells in mouse fetal liver (2009)
  • 著者名/発表者名: Kakinuma S, Ohta H, Kamiya A, Yamazaki Y, Oikawa T, Okada K, and Nakauchi H
  • 雑誌名: J Hepatol (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two flavonoidsextracts from Glycyrrhizae radix inhibit in vitrohepatitis C virus replication (2009)
  • 著者名/発表者名: Sekine-Osajima Y, Sakamoto N, Nakagawa M, Itsui Y, Tasaka M, Nishimura-Sakurai Y, Chen CH, Suda G, Mishima K, Onuki Y, Yamamoto M, Maekawa S, Enomoto N, Kanai T, Tsuchiya K and Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatol Res 39 ページ: 60-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Signaling pathway via TNFa/NFkB in intestinal epithelial cells may be directly involved in colitis-associated carcinogenesis (2009)
  • 著者名/発表者名: Onizawa M, Nagaishi T, Kanai T, Nagano KI, Oshima S, Nemoto Y, Yoshioka A, Totsuka T, Okamoto R, Nakamura T, Sakamoto N, TsuchiyaK, Aoki K, Ohya K, Yagita H and Watanabe M
  • 雑誌名: Am J Physol Gastrntest Liver Physiol (Epub ahead of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sall4 regulates cell fate decision in fetal hepaticstem/progenitor cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Oikawa T, Kamiya A, Kakinuma S, Zeniya M, Nishinakamura R, Tajiri H and Nakauchi H
  • 雑誌名: Gasroenterology 139 ページ: 1000-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Musashi-1 suppressesexpression of Paneth cell-specific genes inhuman intestinal epithelial cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Murayama M, Okamoto R, Tsuchiya K, Akiyama J, Nakamura T, Sakamoto N, Kanai T and Watanabe M
  • 雑誌名: Gasroenterology 44 ページ: 173-82
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatic stem/progenitor cells and stem-cell transplantation for the treatment of liver disease (2009)
  • 著者名/発表者名: Kakinuma S, Nakauchi H and Watanabe M
  • 雑誌名: J Gasroenterology 44 ページ: 167-72
• [雑誌論文] Immunosenescent colitogenicCD4(+) T cells convert to regulatory cells and Dsuppress colitis (2008)
  • 著者名/発表者名: Totsuka T, Kanai T, Nemoto Y, Tomita T, Tsuchiya K, Sakamoto N, Okamoto R and Watanabe M
  • 雑誌名: Eur J Immunol 38 ページ: 1275-86
  • 査読あり
• [雑誌論文] Systemic, but not intestinal, IL-7is essential for the persistence of chronic colitis (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomita T, Kanai T, Nemoto Y, Totsuka T, Okamoto R, Tsuchiya K, Sakamoto N and Watanabe M
  • 雑誌名: J Immunol 180 ページ: 383-90
  • 査読あり
• [雑誌論文] Colitogenic CD4(+) effector-memory T cellsactively recirculate in chronic colitic mice (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomita T, Kanai T, Nemoto Y, Fujii T,Nozaki K, Okamoto R, Tsuchiya K, Nakamura T,Sakamoto N, Totsuka T and Watanabe M
  • 雑誌名: In flamm Bowel Dis
  • 査読あり
• [雑誌論文] Continuous generation ofcolitogenic CD4(+) T cells in persistent colitis (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomita T, Kanai T, Fujii T, Nemoto Y,Okamoto R, Tsuchiya K, Totsuka T, Sakamoto N and Watanabe M
  • 雑誌名: Eur J Immunol 38 ページ: 1264-74
  • 査読あり
• [雑誌論文] MyD88-dependentpathway in T cells directly modulates theexpansion of colitogenic CD4+ T cells in chroniccolitis (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomita T, Kanai T, Fujii T, Nemoto Y, Okamoto R, Tsuchiya K, Totsuka T, SakamotoN, Akira S and Watanabe M
  • 雑誌名: J Immunol 180 ページ: 5291-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of plaque assays forhepatitis C virus-JFH1 strain and isolation ofmutants with enhanced cytopathogenicity and replication capacity (2008)
  • 著者名/発表者名: Sekine-Osajima Y, Sakamoto N, MishimaK, Nakagawa M, Itsui Y, Tasaka M,Nishimura-Sakurai Y, Chen CH, Kanai T, Tsuchiya K, Wakita T, Enomoto N and Watanabe M
  • 雑誌名: Virology 371 ページ: 71-85
  • 査読あり
• [雑誌論文] Negative feedback regulation of colitogenicCD4(+) T cells by increased granulopoiesis (2008)
  • 著者名/発表者名: Nemoto Y, Kanai T, Tohda S, Totsuka T,Okamoto R, Tsuchiya K, Nakamura T, SakamotoN, Fukuda T, Miura O, Yagita H and Watanabe M
  • 雑誌名: In flamm Bowel Dis
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of immunosuppressantson the progression of hepatitis C in hepatitis Cvirus-positive renal transplantation and theusefulness of interferon therapy (2008)
  • 著者名/発表者名: Nanmoku K, Imaizumi R, Tojimbara T, Nakajima I, Fuchinoue S, Sakamoto N, Watanabe M and Teraoka S
  • 雑誌名: Transplant Proc 40 ページ: 2382-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prospero-relatedhomeobox 1 and liver receptor homolog 1coordinately regulate long-term proliferation ofmurine fetal hepatoblasts (2008)
  • 著者名/発表者名: Kamiya A, Kakinuma S, Onodera M, Miyajima A and Nakauchi H
  • 雑誌名: Hepatology 48 ページ: 252-64
  • 査読あり
• [雑誌論文] Blockade of NKG2D signaling prevents the development ofmurine CD4+ T cell-mediated colitis (2008)
  • 著者名/発表者名: Ito Y, Kanai T, Totsuka T, Okamoto R, Tsuchiya K, Nemoto Y, Yoshioka A, Tomita T, Nagaishi T, Sakamoto N, Sakanishi T, OkumuraK, Yagita H and Watanabe M
  • 雑誌名: Am J Physiol Gastro intest Liver Physiol 294 ページ: G199-207
  • 査読あり
• [雑誌論文] FTY720 suppresses the development of colitis in lymphoid-null mice by modulating the trafficking of colitogenic CD4+ T cells in bone marrow (2008)
  • 著者名/発表者名: Fujii T, Tomita T, Kanai T, Nemoto Y,Totsuka T, Sakamoto N, Nakamura T, TsuchiyaK, Okamoto R and Watanabe M
  • 雑誌名: EurJ Immunol 38 ページ: 3290-303
  • 査読あり
• [雑誌論文] Proteasomal degradation ofAtoh1 by aberrant Wnt signaling maintains theundifferentiated state of colon cancer (2008)
  • 著者名/発表者名: Aragaki M, Tsuchiya K, Okamoto R,Yoshioka S, Nakamura T, Sakamoto N, Kanai T and Watanabe M
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 368 ページ: 923-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] TCF/LEF経路を介した肝幹・前駆細胞成熟化の調節機構 (2008)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴
  • 雑誌名: 臨床消化器内科 23巻13号 ページ: 1813-1819
• [雑誌論文] Hepatitis C virus non-structural proteins responsible for suppression of the RIG-I/Cardif-induced interferon response (2007)
  • 著者名/発表者名: Tasaka M, Sakamoto N, Itakura Y,Nakagawa M, Itsui Y, Sekine-Osajima Y,Nishimura-Sakurai Y, Chen CH, Yoneyama M,Fujita T, Wakita T, Maekawa S, Enomoto N and Watanabe M
  • 雑誌名: J Gen Virol 88 ページ: 3323-33
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bone morphogenetic protein-7 and interferon-alpha synergistically suppresshepatitis C virus replicon (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto N, Yoshimura M, Kimura T, Toyama K, Sekine-Osajima Y, Watanabe M and Muramatsu M
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 357 ページ: 467-73
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibition of hepatitis C virus infection and expression in vitro and in vivo by recombinant adenovirus expressing short hairpin RNA (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto N, Tanabe Y, Yokota T, Satoh K, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Itsui Y, Tasaka M, Sakurai Y, Chen CH, Yano M, Ohkoshi S,Aoyagi Y, Maekawa S, Enomoto N, Kohara M and Watanabe M
  • 雑誌名: J Gastroenterol Hepatol
  • 査読あり
• [学会発表] Flowcytometric analysis of cell surfacemolecules on mouse fetal hepaticstem/progenitor cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Kakinuma S, Kamiya A, Ohta H, Nakauchi H
  • 学会等名: FASEB summer research conference , Liver growth,development and disease
  • 発表場所: Snowmass, CO, USA
  • 年月日: 20080800
• [学会発表] 肝幹/前駆細胞表面抗原の網羅的解析と細胞移植 (2008)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴、紙谷聡英、中内啓光
  • 学会等名: JDDW2008(第12回日本肝臓学会大会ワークショップ/肝再生 ; 基礎と臨床のBridge研究)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-10-18
• [学会発表] 胎生中期肝幹/前駆細胞表面抗原の解析と細胞移植 (2008)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴、太田春彦、紙谷聡英、中内啓光
  • 学会等名: 第15回肝細胞研究会(シンポジウム/肝障害と幹細胞~肝修復における幹細胞の役割)
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2008-06-28
• [学会発表] 3cmを超える肝細胞癌に対する当科の治療方法と成績 (2008)
  • 著者名/発表者名: 陳正新、坂本直哉、井津井康浩、中川美奈、櫻井幸、須田剛生、山本満千、小貫優子、三島果子、渡辺守
  • 学会等名: 第44回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 松山
  • 年月日: 2008-06-06
• [学会発表] 肝幹/前駆細胞表面抗原のFACSによる網羅的解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴、太田春彦、紙谷聡英、中内啓光
  • 学会等名: 第44回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 松山(口演)
  • 年月日: 2008-06-06
• [学会発表] ラジオ波熱凝固療法における第二世代超音波造影剤の有用性 (2007)
  • 著者名/発表者名: 陳正新、坂本直哉、井津井康浩、中川美奈、筬島裕子、田坂めぐみ、櫻井幸、渡辺守
  • 学会等名: JDDW2007(第10回日本肝臓学会大会)
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2007-10-18
• [学会発表] TCF/LEF活性化による肝幹/前駆細胞の分化・増殖の調節 (2007)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴、紙谷聡英、中内啓光
  • 学会等名: JDDW2007(第10回日本肝臓学会大会ワークショップ/肝の再生医学・医療/人工肝臓の現状と展望)
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2007-10-18
• [学会発表] 肝幹/前駆細胞におけるTCF/LEF活性化 (2007)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴、紙谷聡英、中内啓光
  • 学会等名: 第14回肝細胞研究会(ワークショップ/肝幹細胞研究の現況と展望)
  • 発表場所: 鹿児島
  • 年月日: 2007-06-23
• [学会発表] Wnt/TCF signaling pathwayを介した肝前駆細胞成熟化の調節機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴、紙谷聡英、中内啓光
  • 学会等名: 第43回日本肝臓学会総会(ワークショップ/肝再生とその臨床応用)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-05-31
• [学会発表] 当科における高齢肝細胞癌患者に対するラジオ波熱凝固療法の治療成績 (2007)
  • 著者名/発表者名: 陳正新、坂本直哉、渡辺守
  • 学会等名: 第43回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-05-31
• [図書] 幹細胞を用いた肝再生医療の可能性 (2009)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴
  • 出版者: iPS細胞の産業的応用技術(シーエムシー出版)(印刷中)
• [図書] Wnt-TCF/LEF経路による肝幹細胞の分化・増殖調節機構の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴
  • 総ページ数: 53-58
  • 出版者: Liver Forum in Kyoto第10回学術集会記録集(メディカルトリビューン)
• [図書] 幹細胞-肝幹細胞を用いた細胞移植の可能性 (2007)
  • 著者名/発表者名: 柿沼晴
  • 総ページ数: 76-82
  • 出版者: 再生医療技術の最前線(シーエムシー出版)