| 研究概要 |
当初の研究計画書ではin vitroの実験は平成20年度に行う予定であったが、臨床検体の収集状況が遅延していることから、平成19年度からin vitroの実験を開始した。まずは、肉腫型中皮腫細胞株であるH28を用い、オステオポンチン(OPN)の発現を確認後、細胞接着試験、細胞遊走試験、細胞増殖試験、アポトーシス関連実験等を行った。H28はOPNとインテグリンavR3受容体を介して強固に結合し、OPNに対する強い細胞遊走、増殖活性を示した。また、OPNはH28と結合することでアポトーシスの阻害効果を示すことも明らかにした。OPNの中皮腫細胞に及ぼす機能調節はインテグリンに結合するFAK(focal adhesion kinase)の活性化を介することも明らかにした。以上のOPNの中皮腫細胞の細胞機能に及ぼす効果はOPNが抗癌剤を調節することを示唆する。この仮説を証明するためにH28にoPNのsiRNAを導入しoPNの発現抑制を試みたがoPNの発現低下は得られなかった。したがって、次にOPNの発現の低い二相型中皮腫細胞であるMeso-1にマウスOPNを遺伝子導入した遺伝子導入株Meso-1/OPNと、ベクターのみを遺伝子導入したコントロール株Meso-1/Mockを樹立し、各種抗癌剤(Gemcitabine,Pemetrexed,Vinorelbine,cisplatin,paclitaxe1,CPT-11)に対する抗癌剤感受性試験を行った。現在までに、Meso-1/OPNはMeso-1/Mockに比較してGemcitabine,vinorelbine,Pemetrexedに対してより抗癌剤耐性である結果を得ている。現在、OPNによるこれら抗癌剤耐性獲得機序について検討中である。
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