| 研究概要 |
多発性骨髄腫細胞は骨髄から完全に排除することが困難で、治癒を得ることは難しい。その理由として、骨髄stroma細胞と腫瘍細胞の相互作用によって惹起されるCell adhesion mediated drug resistance,CAM-DR)という薬剤耐性機構が想定されている。申請者は昨年度までに、骨髄腫細胞株においては、Wnt-RhoA-ROCKシグナル伝達系を介して、ストローマ細胞への接着性と薬剤耐性が増強されることを見出した。今年度は、Fasudilなどヒトに投与可能なROCK inhibitorや、抗integrinペプチドを用いたin vitroの検討を行うと共にin vivoの骨髄腫動物実験モデルの確立を試みた。その結果、Fasudilの活性型:OH-Fasudil10μMを作用させることで、doxorubicinおよびmelpharanに対するCAM-DRはほぼ完全に解除されることが明らかとなった。また、抗integrin α4,5,6および抗integrin β1抗体を作用させても、骨髄stroma細胞とWnt3高発現細胞株であるKMS5およびARH77との接着性に変化を認めなかった。ところが、抗RGDペプチドであるGRGDSあるいはcRGDfVで約50%の骨髄腫細胞がストローマ細胞との接着性を失い、さらに、GRGDSとcRGDfVをコンビネーションで用いると、約90%の骨髄腫細胞がストローマ細胞から乖離することが明らかとなった。さらに、GRGDSあるいはcRGDfVペプチド存在下でdoxorubicinに対するCAM-DRをMTTアッセイで解析した結果、著名に薬剤耐性が解除されることが明らかとなった。In vivoでの検討を行う目的で、KMS5細胞をGFP発現レトロウイルスベクターを用いてラベルし、尾静脈から静注投与したところ、骨髄、卵巣および肝に腫瘍浸潤を形成するモデルが確立できた。
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