関節炎発症における中枢・末梢応答の遺伝子改変動物を用いた可視的評価と病態解明

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19591771
• 研究機関: 産業医科大学
• 研究代表者: 大西 英生 産業医科大学, 医学部, 講師 (20279342)
• キーワード: 関節炎 / 遺伝子改変動物 / バゾプレッシン / ストレス / 緑色蛍光タンパク

研究概要

(1)バゾプレッシン(AVP)-eGFPトランスジェニックラットアジュバント関節炎発症における視床下部-下垂体-副腎(HPA)軸の時系列的効果
AVP-eGFPトランスジェニックラットに発症したアジュバント関節炎では関節リウマチと同様、血中AVP濃度と血中コルチコステロン濃度が上昇していることが確認された。一方in situハイブリダイゼーション法では、視床下部室傍核小細胞群におけるcorticotropine-releasing hormone (CRH) mRNAの発現は抑制され、eGFP mRNAの発現は室傍核小細胞群と大細胞群の中で、大細胞群を中心に増加した。これらより、アジュバント関節炎におけるACTH分泌亢進には視床下部CRHよりもAVP産生の亢進が関与していることが明らかとなった。さらに、アジュバント関節炎においてeGFPの緑色蛍光が視床下部室傍核大細胞群と下垂体後葉において増強することも確認され、慢性炎症モデルにおける中枢神経系の神経内分泌反応をin vivoの状態で視覚的に評価する方法が確立された。
(2)AVP-eGFPトランスジェニックラットの急性疼痛ストレスと炎症ストレスでのHPA軸の変化
疼痛ストレスモデルとして5%ホルマリン液をAVP-eGFPトランスジェニックラットの後肢足底部に皮下注射すると、注射後15分で血中AVP濃度が上昇し、2時間後には元のレベルにもどることが確認された。さらに、in situハイブリダイゼーション法で視床下部室傍核小細胞群におけるeGFP mRNAならびにCRH mRNAの発現が上昇すること、室傍核小細胞群と下垂体後葉でeGFP蛍光も増強していることが確認された。AVPはストレスと密接に関連しているが、急性疼痛ストレスと慢性炎症・疼痛ストレスではその発現様式に違いを認めることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Response of arginine vasopressin-enhanced green fluorescent protein fusion gene in the hypothalamus of adjuvant-induced arthritic rats (2009)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H., Onaka, T., Kasai M., Kawasaki, M., Ohnishi, H., Otsubo, H., Saito, T., Hashimoto, H., Yokoyama, T., Fujihara, H., Dayanithi, G., Murphy, D., Nakamura, T., Ueta, Y.
  • 雑誌名: Journal of Neuroendocrinology 21(3) ページ: 183-190
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adrenomedullin 2/intermedin-like immunoreactivity in the hypothalamus and brainstem of rats. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, H., Kitamura, K., Kawasaki, M., Saito, T., Suzuki, H., Otsubo, H., Ohbuchi, T., Yokoyama, T., Fujihara, H., Takei, Y., Ueta, Y.
  • 雑誌名: Autonomic Neuroscience : Basic and Clinical 139(1-2) ページ: 46-54
  • 査読あり
• [雑誌論文] Distribution of orexins-containing fibers and contents of orexins in the rat olfactory bulb (2008)
  • 著者名/発表者名: Shibata, M., Mondal, MS., Date, Y., Nakazato, M., Suzuki, H., Ueta, Y.
  • 雑誌名: Neuroscience Research 61(1) ページ: 99-105
  • 査読あり
• [学会発表] Effects of formalin-induced nociceptive stimulation in the hypothalamus of arginine vasopressin-enhanced green fluorescent protein transgenic rats (2008)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H., Kawasaki, M., Ohnishi, H., Otsubo, H., Ohbuchi, T., Hashimoto, H., Yokoama, T., Fujihara, H., Dayanithi, G., Murphy, D., Nakamura, T., Ueta, Y.
  • 学会等名: Society for Neuroscience Annual Meeting
  • 発表場所: Washington DC, USA
  • 年月日: 20081115-20081119
• [学会発表] Response of arginine vasopressin-enhanced green fluorescent protein fusion gene in the hypothalamus of formalin-induced nociceptive stimulated rats (2008)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, H., Kawasaki, M., Ohnishi, H., Otsubo, H., Yokoyama, T., Fujih H., Otsubo, H., Yokoyama, T., Fujiara, H., Dayanithi, G., Murphy, D., Nakamura, T., Ueta, Y.
  • 学会等名: The 3^<rd> Asian Pain Symposium
  • 発表場所: Fukuoka, Japan
  • 年月日: 20080718-20080719
• [学会発表] 関節炎モデルラットならびに癌悪液質モデルラットにおける視床下部摂食関連ペプチド遺伝子発現 (2008)
  • 著者名/発表者名: 鈴木仁士, 上田陽一, 渡部美穂, 小沼悦郎, 岡部尚文, 橋本弘史, 藤原広明, 多久和陽, 尾形悦郎
  • 学会等名: 第81回日本内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 青森
  • 年月日: 20080516-20080518