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2008 年度 実績報告書

組織障害の新指標 : 膜インターフェースにおける骨格蛋白質のヒドロキシノネナール修飾

研究課題

研究課題/領域番号 19658116
研究機関北海道大学

研究代表者

稲葉 睦  北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (00183179)

研究分担者 佐藤 耕太  北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 准教授 (50283974)
大塚 弥生  北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 客員研究員 (30396303)
キーワード細胞膜 / 膜骨格 / 脂質過酸化 / 組織傷害 / ヒドロキシノネナール / 酸化障害
研究概要

A. 酸化剤により人為的に過酸化傷害を生じさせた赤血球、対照新鮮赤血球からATP存在下、非存在下で膜ゴーストを作製し、それぞれのスペクトリンについて、HNE付加量と付加部位を抗HNE抗体でのイムノブロットとプロテアーゼ分解フラグメントのMALDI-TOF MS解析で比較解析した。その結果、ATP存在下、即ち生理的条件下の赤血球膜では、同じ酸化負荷をかけてもATP非存在下に比べHNE修飾の程度が有意に低いことが明らかになった。修飾部位は、α-、β-スペクトリンともに、膜脂質との相互作用が示唆されている領域に集中しており、酸化剤存在下では、ATP非存在下で親水性領域に検出される傾向が特にα-スペクトリンで認められた。HNE修飾スペクトリンと膜反転小胞との結合は現在検討中である。
B. 脳、筋のホモジェネートのイムノブロットでスペクトリン類似蛋白質のHNE修飾を検出することを試みた。200kDaより大きな分子サイズの領域に弱いシグナルを認めたが、分子の同定には至っていない。現在、MALDI-TOF MSによる解析を継続中である。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2008

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Identification of genes for two major sialoglycoproteins, glycophorin A and glycophorin C in canine red cell membranes2008

    • 著者名/発表者名
      Sato,K, 他6名
    • 雑誌名

      Japanese Journal of Veterinary Research 55

      ページ: 103-114

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Expression of α-hemoglobin stabilizing protein and cellular prion protein in a subclone of murine erythroleukemia cell line MEL2008

    • 著者名/発表者名
      Otsuka, Y., 他3名
    • 雑誌名

      Japanese Journal of Veterinary Research 56

      ページ: 75-84

    • 査読あり
  • [学会発表] A novel posttranslational modification with 4-hydroxynonenal of spectrin, the major red cell membrane skeletal protein2008

    • 著者名/発表者名
      Arashiki, N.、他5名
    • 学会等名
      第81回日本生化学会大会
    • 発表場所
      神戸市、国際会議場
    • 年月日
      20081209-12
  • [学会発表] 赤血球膜の酸化傷害とスペクトリンの4-ヒドロキシノネナール修飾2008

    • 著者名/発表者名
      新敷信人、他5名
    • 学会等名
      第30回日本膜学会年会
    • 発表場所
      東京都、東京理科大・森戸記念館
    • 年月日
      20080515-16

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公開日: 2010-06-11   更新日: 2016-04-21  

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