1.ヘテロクロマチン構造変換をモニターする系の構築:RNAによるシグナルがどのようにクロマチン構造変換を導くのか、その変換過程を検証するため、ヒストンメチル化酵素であるClr4の温度感受性変異株を単離し、その有用性の検討を行った。その結果、温度によるClr4の酵素活性の制御が難しく、効率良くクロマチン構造変換を引き起こすには、さらに誘導系を改良する必要があることが事が明らかとなった。 2.新規RNAi関連因子の機能解析:本年度はまずRNAの代謝に関与しヘテロクロマチン局在をする分裂酵母の新規因子Rmh1/Grc3の機能解析を進め、Rmh1/Grc3の局在がSwi6やClr4などのヘテロクロマチン関連因子に依存していること、Crb3やLas1を含む複数の新規因子と複合体を形成している事を明らかにした。またRmh1/Grc3の過剰発現によってヘテロクロマチンサイレンシングが増強され、逆に保存されたドメインに変異を導入した変異体の過剰発現では、サイレンシングの解除が起きることを見出した。これらの結果は、この新規因子がヘテロクロマチン由来のRNAの代謝を通じてサイレンシングを制御する因子であることを示す結果である。興味深いことに、Rmh1/Grc3の変異株ではリボソームRNAの成熟にも異常が生じるから、ヘテロクロマチン由来のRNAのプロセスとrRNA代謝のプロセスに共通するメ力ニズムの存在が示唆された。 3.RNAiと遺伝的に相互作用する因子の単離:遺伝的スクリーニングに必要なベクターの構築、分裂酵母株の作製を継続して行った。
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