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(1)Zic2タンパク質におけるリン酸化部位
研究代表者は転写制御因子Zic2(Zinc finger protein of cerebellum)タンパク質がDNA-PK(DNA dependent protein kinase)によってリン酸化を受けていることを解明した。そこで本年度はアラニンスキャンニングの手法を用いて実際のリン酸化部位(Ser200)を決定した。200番目のセリンは全てのZicファミリータンパク質とZicを持つ全ての生物種に保存されている。この200番目のセリン残基に人為突然変異を起こすと、DNA-PKによるリン酸化が起こらないことを確認。また、この突然変異タンパク質は転写の活性可能を持たないことを発見した。これらにより、Zic2の転写制御因子としての機能はリン酸化修飾によっても制御されていることが解った。
(2)Zic2はTGIFの発現を直接制御する
これまでZic2の被制御遺伝子をChIPクローニングの手法を用いて捜索し、多数の遺伝子の候補を得ている。その中でも注目すべきはTGIF(TG-interacting factor)である。なぜならTGIFはZIC2遺伝子と共に全前脳症の原因遺伝子と考えられており、この2つが直接の関わりを持つことは非常に興味深い。今回Zic2の遺伝子変異マウスでTGIFの発現を詳細に解析した所、野生型のマウスに比べ、発現が少ないことが明らかとなった。
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