抑制性ニューロンに発現するNMDA受容体の局在・機能に関する分子解剖学的研究

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19700315
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 深谷 昌弘 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助教 (10360900)
• キーワード: NMDA受容体 / 抑制性ニューロン / NR2D / NR3A / 大脳皮質 / 海馬 / 小脳 / 免疫電子顕微鏡法

研究概要

本研究課題では、抑制性ニューロンにおいて発現するNMDA受容体の調節サブユニットであるNR2DおよびNR3Aサブユニットに着目し、その発現細胞と細胞内局在、それらを介する神経回路、シナプス可塑性への関与の有無を明らかにすることを目的として研究を行った。まず、マウス大脳皮質および海馬での抑制制ニューロンにおけるNMDA受容体NR2Dサブユニットに対する特異抗体を用いた局在解析を蛍光多重免疫染色法や免疫電子顕微鏡法を用いて行った。その結果、大脳皮質のNR2Dサブユニットは、parvalbumin陽性介在抑制性ニューロンの非対称性シナプスの後シナプス部位に局在していた。また、これらの前シナプスはVGluT1, VGluT2陽性であることから大脳皮質-大脳皮質間と視床-大脳皮質間のシナプス両方に発現することが明らかとなった。さらに、海馬においてもparvalbumin陽性介在抑制性ニューロンに発現していた。これらの結果から、NR2Dサブユニットは一部の介在ニューロンの興奮性シナプス後部で機能していることが示唆された。一方、小脳におけるNR3Aサブユニットに対する特異抗体を用いた局在解析を行ったところ、小脳分子層の介在抑制性ニューロンであるStellate細胞およびBasket細胞に発現し、免疫電子顕微鏡解析から登上線維終末に接する介在ニューロンの樹上突起に局在することが明らかとなった。また、この部分は興奮性シナプスの構造は認められず対称性シナプス様の構造を有していたが、シナプス前終末でのactive zoneに見られるシナプス小胞の集積が認められず、シナプス結合ではないと考えられた。さらに大脳皮質や海馬においても同様の局在が介在ニューロンで認められた。このような結合領域にNMDA受容体が局在することはこれまでに報告がなく、NMDA受容体が全く新しい機能を有する可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Ablation of NMDA receptors enhances the excitability of hippocampal CA3 neurons (2009)
  • 著者名/発表者名: Fukushima, F., Nakao, K., Shinoe, T., Fukava, M., Muramatsu S, Sakimura, K., Kataoka, H., Mori, H., Watanabe, M., Manabe, T., Mishina, M.
  • 雑誌名: ProS ONE 4 ページ: e3993
  • 査読あり
• [雑誌論文] IQ-ArfGEF/BRAG1 is a guanine nucleotide exchange factor for Arf6 that interacts and localizes with PSD-95 at excitatory synapses (2008)
  • 著者名/発表者名: Sakagami H, Sanda M, Fukaya M, Miyazaki T, Sukegawa J, Yanagisawa T, Suzuki T, Fukunaga K, Watanabe M, Kondo K
  • 雑誌名: Neurosci Res 60 ページ: 199-212
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of FAK ablation on cerebellar foliation, Bergmann glia and climbing fiber territory on Purkinje cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Watanabe F, Miyazaki T, Takeuchi T, Fukaya M, Nomura T, Noguchi S, Mori H, Sakimura K, Watanabe M, Mishina M
  • 雑誌名: Eur. J. Neurosci 27 ページ: 836-854
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional contributions of synaptically localized NR2B subunits of the NMDA receptor to synaptic transmission and long-term potentiation in the adultmouse CNS (2008)
  • 著者名/発表者名: Miwa H, Fukava M, Watabe AM, Watanabe M, Manabe T
  • 雑誌名: J. Physiol 586(10) ページ: 2539-2550
  • 査読あり
• [雑誌論文] Glutamate transporters regulate lesion-induced period plasticity in the developing somatosensory cortex (2008)
  • 著者名/発表者名: Takasaki C, Okada R, Mitani A, Fukava, M, Yamasaki M, Fujihara Y, ShirakawaT. Tanaka K. Watanabe M
  • 雑誌名: J. Neurosci 28 ページ: 4995-5006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synapse formation and clustering of neuroligin-2 in the absence of GABAA receptors (2008)
  • 著者名/発表者名: Patrizi A, Scelfo B, Viltono L, Briatore F, Fukaya M, Watanabe M, Strata P, Varoqueaux F, Brose N, Fritschy JM, Sassoe-Poonetto M
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105(35) ページ: 13151-13156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cloning and characterization of E-dlg, a novel splice variant of mouse homologue of the Drosophila discs large tumor suppressor binds preferentially to SAP102 (2008)
  • 著者名/発表者名: Mao P, Tao Y-X, Fukava M, Li D, Tao T, Watanabe M, Johns RA
  • 雑誌名: IUBMB(International Union of Biochemistry and Molecular Biology)Life 60 ページ: 684-692
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced cerebellar LTD induction and OKR adaptation in mice lacking delphilin (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi, T., Ohtsuki, G., Yoshida, T., Fukava, M., Wainai, T., Yamashita M, Yamazaki Y, Mori, M., Sakimura, K., Kawamoto, S., Watanabe, M., Hirano T Mishrina. M.
  • 雑誌名: PLoS One(on-line journal) 3(5) ページ: e2297
  • 査読あり
• [雑誌論文] Use-dependent amplification of presynaptic Ca^<2+> signaling by axonal ryanodine receptors at the hippocampal mossy fiber synapse (2008)
  • 著者名/発表者名: Shimizu H, Fukava M, Yamazaki M, Watanabe M. Manabe T, Kamiva H
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105 ページ: 11998-12003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression and possible role of creatine transporter in the brain and at the blood-cerebrospinal fluid barrier as a transporting protein of guanidinoacetate, an endogenous convulsant (2008)
  • 著者名/発表者名: Tachikawa M, Fujinawa J, Takahashi M, Kasai Y, Fukava M, Sakai K, Yamazaki M, Tomi M, Watanabe M, Sakimura K, Terasaki T, Hosoya K
  • 雑誌名: J. Neurochem 107 ページ: 768-778
  • 査読あり
• [雑誌論文] Predominant expression of phospholipase CR1 in telencephalic principal neurons and cerebellar interneurons, and its close allocation with related signaling molecules in somatodendritic neuronal elements (2008)
  • 著者名/発表者名: Fukava M, Uchigashima M, Nomura S, Hasegawa Y, Kikuchi H, Watanabe M
  • 雑誌名: Eur J Neurosci 28 ページ: 1744-1759
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diacylglycerol kinase β accumulates on the perisynaptic site of medium spiny neurons in the striatum (2008)
  • 著者名/発表者名: Hozumi Y, Fukava M, Adachi N, Saito N, Otani K, Kondo H, Watanabe M, Goto K
  • 雑誌名: Eur J Neurosci 28 ページ: 2409-2422
  • 査読あり