家庭の水道水から感染する消化管寄生原虫における食環境整備の基礎研究

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19700609
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 食生活学
• 研究機関: 大阪夕陽丘学園短期大学
• 研究代表者: 松林 誠 大阪夕陽丘学園短期大学, 准教授 (00321076)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• キーワード: 食環境 / 水道水 / クリプトスポリジウム / 下痢 / 原虫

研究概要

クリプトスポリジウム、サイクロスポーラ、ジアルジア等の原虫類は、感染・汚染源となる動物種、さらに人を含めた宿主体内での侵入過程は未だ不明である。これらの点を解決する基礎データを得るため、汚染源として家畜を調査し、検出された原虫について遺伝子配列解析により種を同定した。また、体内で原虫がどのように増殖し、環境中に糞便と共に放出されるのかを解明するため、わが国においても多数の感染者が報告されているクリプトスポリジウムをターゲットに、その感染機序を解析した。その結果、21都道府県の成牛213頭中、7都道府県12頭(5.9%)からCryptosporidiumが検出された。8都道府県の成豚129頭からは、本原虫は検出されなかった。牛から検出された全株はマウスへの感染性を有し、諸外国で報告されている株とは生物学的性状が異なるC.andersoni novel typeであることが分かった。我が国の牛において、Cryptosporidium感染は広く分布していることが示唆された。また、本調査により、糞便由来・環境由来感染となるEimeria原虫に加え、回虫、鞭虫、毛細線虫が検出されたことから、牛・豚において飼育環境改善の必要性が示唆された。
C. parvumの侵入型虫体の微細構造を解析した結果、スポロゾイトにはapical rings、electron densecollar、およびcentral microtubulesが観察された。subpellicular microtubulesは無く、スポロゾイト全体の膜間にlongitudinal ridgesが観察された。抗α-tubulinを用いた免疫電顕では、これらの細胞骨格器官が反応し、分子量約50-kDa (pL6.24)の抗原が検出された。このことから、宿主細胞の上皮のみに感染し、増殖するクリプトスポリジウムは、他の原虫の侵入型虫体とは異なる骨格構造を持つことが判明した。また、これらの侵入型虫体は、脱嚢後速やかに死滅するこが判明し、感染部位である腸管内では即時に宿主細胞へと侵入することが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Coprological survey of parasitic infections in pigs and cattle in slaughterhouse in Osaka (2009)
  • 著者名/発表者名: Matsubayashi M., Kita T., Narushima T., Kimata I., Tani H., Sasai K., Baba E.
  • 雑誌名: Japan. Journal of Veterinary Medical Science. 71 ページ: 1079-83
• [雑誌論文] Electron microscopic observation of cytoskeletal frame structures and detection of tubulin on the apical region of Cryptosporidium parvm sporozoites. (2008)
  • 著者名/発表者名: Matsubayashi M, Takase H, Kimata I, Nakagawa H, Tani H, Sasai K, Baba E.
  • 雑誌名: Parasitology. 135 ページ: 295-301
• [雑誌論文] Characterization of monoclonal antibodies that recognize the Eimeria tenella microneme protein MIC2 (2008)
  • 著者名/発表者名: Sasai K., Fetterer R.H., Lillehoj H., Matusra S., Constantinoiu C.C., Matsubayashi M., Tani H., Baba E.
  • 雑誌名: Journal of Parasitology. 94 ページ: 1432-4
• [雑誌論文] Genetical survey of novel type of Cryptosporidium andersoni in cattle in Japan. (2008)
  • 著者名/発表者名: Matsubayashi M., Nagano S., Kita T., Narushima T., Kimata I., Iseki M., Hajiri T., Tani H., Sasai K., Baba E.
  • 雑誌名: Veterinary Parasitology. 158 ページ: 44-50
• [雑誌論文] Detection of a mixed infection of a novel Cryolosporidium andersoni and its subgenotype in Japanese cattle. (2007)
  • 著者名/発表者名: Nagano S., Matsubayashi M., Kita T., Narushima T., Kimata I., Iseki M., Hajiri T., Tani H., Sasai K. Baba E.
  • 雑誌名: Veterinary Parasitology. 149 ページ: 213-218
• [雑誌論文] Morphological changes and viability of Cryplosporidium parvum sporozoites after excystation in cell-free culture media.
  • 著者名/発表者名: Matsubayashi M., Ando H., Kimata I., Nakagawa H., Furuya M., Tani H. Sasai K.
  • 雑誌名: Parasitology. (In press)
• [学会発表] Cryptosporidium andersoni novel typeの成熟および哺乳マウスにおける感染性について (2009)
  • 著者名/発表者名: 松林誠. 長野早希、木俣勲、木太俊雅、古家優、谷浩行、笹井和美
  • 学会等名: 第65回日本寄生虫学会西日本支部大会
  • 年月日: 20090000
• [学会発表] Cryptosporidiumの細胞骨格構造の電子顕微鏡学的解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 松林誠、高瀬弘嗣、木俣勲、中川英紀、谷浩行、笹井和美、馬場栄一郎
  • 学会等名: 第145回日本獣医学会学術大会
  • 年月日: 20080000
• [学会発表] Molecular Characterization of the Novel Type of Cryptosporidium andersoni Detected in Japan. (2008)
  • 著者名/発表者名: Matsubayashi M., Nagano S., Kita T., Narushima T. Isao Kimata I., Iseki M., Hajiri T., Tani H., Sasai K., Baba E.
  • 学会等名: 16th Japanese-German Cooperative Syinposium on Protozoan Disease
  • 発表場所: Program and Abstracts of Papers
  • 年月日: 20080000
• [備考]
  • URL: http://www.oyg.ac.jp/