アミロイドβペプチド(Aβ)埋込蛍光タンパク質の構築とAβ集合体のFRET検出

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19710183
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物分子科学
• 研究機関: 東京工業大学
• 研究代表者: 高橋 剛 東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科, 助教 (90345380)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• キーワード: アミロイドβペプチド / 緑色蛍光タンパク質 / 蛍光共鳴エネルギー移動 / βシート / タンパク質工学 / オリゴマー / アルツハイマー病 / アミロイド線維

研究概要

アミロイドβペプチド(Aβ)の集合化・オリゴマー生成は、アルツハイマー病の発症と密接に関連している。本研究では、バレル構造を有する緑色蛍光タンパク質(GFP)中のβシート上にAβ配列を挿入したGFP変異体(Aβ埋込GFP)を基に蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)型センサータンパク質を構築した。この構築したセンサータンパク質を用いることで、試験管内においてAβの集合体形成過程をFRETにより検出できることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Selection and structural analysis of de novo proteins from an a3b3 genetic library (2009)
  • 著者名/発表者名: M. T. Jumawid, T. Takahashi, T. Yamazaki, H. Ashigai, H. Mihara
  • 雑誌名: Protein Science 18 ページ: 384-398
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peptide and protein mimetics inhibiting the amyloid b-peptide aggregation (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Takahashi, H. Mihara
  • 雑誌名: Accounts of Chemical Research 41 ページ: 1309-1318
  • 査読あり
• [雑誌論文] Design of peptides that form amyloid-like fibrils capturing amyloid b1-42 peptides (2007)
  • 著者名/発表者名: J. Sato, T. Takahashi, H. Oshima, S. Matsumura, H. Mihara
  • 雑誌名: Chem. Eur. J. 13 ページ: 7745-7752
  • 査読あり
• [雑誌論文] Embedding the amyloid b-peptide (Ab) sequence in green fluorescent protein (GFP) inhibits Ab oligomerization (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Takahashi, K. Ohta, H. Mihara
  • 雑誌名: ChemBioChem 8 ページ: 985-988
  • 査読あり
• [学会発表] アミロイドbペプチド(Ab)配列を挿入した蛍光タンパク質によるAb集合化阻害と検出 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高橋剛, 太田健一, 三原久和
  • 学会等名: 第3回バイオ関連化学合同シンポジウム
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20080918-20
• [学会発表] 設計ペプチド・タンパク質を用いたアルツハイマー病アミロイドbペプチド(Ab)の凝集制御と細胞毒性 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高橋剛, 鈴木美穂, 村越祐子, 太田健一, 三重正和, 小畠英理, 三原久和
  • 学会等名: 第18回バイオ・高分子シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20080725-26
• [学会発表] アミロイドbペプチド(Ab)配列を挿入した新規タンパク質の設計とAb集合化阻害 (2007)
  • 著者名/発表者名: 高橋剛, 太田健一, 三原久和
  • 学会等名: 第17回バイオ・高分子シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20070730-31
• [図書] 酵素・タンパク質をはかる・とらえる・利用する(岡畑恵雄、三原久和編)第5章アミロイドタンパク質をはかる (2009)
  • 著者名/発表者名: 高橋 剛, 三原久和(分担執筆)
  • 総ページ数: 54-64
  • 出版者: 工学図書株式会社