| 研究概要 |
光受容体フィトクロムA(phyA)をbait,シロイヌナズナのcDNAライブラリLーをpreyとして,大腸菌を用いたtwo-hybridスクリーニングを行った.ポジティブコントロールとして既にphyAとの相互作用が確認されているPIF3をpreyとして用いた場合には,選択培地上においてもコロニーが確認出来,このシステムでphyAの相互作用タンパク質をスクリーニング出来る事が示された.cDNAライブラリーのスクリーニングによって得られたクローンの配列解析によって,これまでにphyAとの相互作用が知られておらず,かっ,植物中での機能が明らかでないキナーゼ様タンパク質や転写因子と予想される数種類の候補タンパク質が選抜された.このうちのいくつかのタンパク質については,T-DNAの挿入によるノックアウトラインを入手し,現在ホモ体の取得中である.また,候補タンパク質にDsRedを融合させたタンパク質を発現するためのコンストラクトを構築した.今後,phyA:GFPとDsRedを融合させた候補タンパク質群を共発現させることで,phyAと候補タンパク質の共局在を確認する予定である.また,本研究に関連してphyA下で制御されている一次代謝物群の解析や,寄生植物中のフィトクロムの配列比較によって新しい知見を得ており,これらについては論文発表ならびに学会発表を行った.
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