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癌抑制遺伝子APC(adenomatou polyposis coli)は、大腸癌の大多数の症例で変異が見出されており、大腸腺腫・癌発症の原因遺伝子であると考えられている。さらに、APCは脳神経系おいて最も高い発現がみられることから、神経細胞の機能に重要な役割を担っていることも示唆されている。我々はAPC結合蛋白質としてAsefとNeurodaplを見出し、PC12細胞においてAsefとNeurodaplはNGF刺激依存的な神経突起伸長に重要であること、及びNeurodaplはAPCのユビキチン化を引き起こし、プロテアソーム依存的な分解を誘導することを見出している。
まず、我々はVinusを付加したAsef及びNeurodaplをPC12細胞に強制発現し蛍光イメージングによりその挙動を観察したところ、両者とも主に細胞質に局在すること、及びAsefの一部はラッフリング膜へ濃縮していることが明らかとなり、微小管上を+端方向へ移動し細胞膜近傍に濃縮するAPCの挙動とは明らかに異なることを見出した。これらの結果から、細胞膜近傍に集積したAPCがAsefと複合体を形成し、Asefの活性を制御していることが示唆された。
また、Neurodapl(-/-)及びWild-typeマウスから得られた海馬及び小脳由来初代培養細胞を用いてNeurodaplによるAPCのユビキチン化・分解の意義を検討した。現在までに、NGF、BDNF、或いはNT3刺激で誘導される神経突起伸長、APCユビキチン化・分解には、Neurodaplの有無による明確な有意差は認められていない。使用する細胞種、得られた細胞の培養条件、及び細胞を採取するマウスの週令について今後検討していく必要があると考えている。
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