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本研究ではSema6D-plexin-A1相互作用の樹状細胞および破骨細胞に対する活性に注目し、特に本年度では樹状細胞や破骨細胞におけるplexin-A1下流のシグナル伝達経路へのFARP2およびMICALの関与を検討した。
1、マクロファージ株化細胞であるRAW細胞を用いてFARP2-Dominant Negative formを恒常的に発現するCell Lineを樹立した。この細胞を破骨細胞分化誘導因子であるRANKLで刺激したところ、親株細胞で認められる多核破骨細胞への分化が顕著に障害されることが明らかになった。この結果から、FARP2が破骨細胞の分化過程に重要な機能を有する可能性が示唆された。
2、FARP2の生体内における機能を明らかにするために、FARP2遺伝子欠損マウスの作成を行った。FARP2に対するtargeting vectorを作成し、ES細胞に導入することによって相同組み換えを起こしたクローンを樹立した。この樹立したESクローンをマウス受精卵にmicroinjectionし、現在キメラマウスを得ている。
3、MICALの生体内にける機能を明らかにするために、MICAL遺伝子欠損マウスの作成を行った。MICALに対するtargeting vectorを作成し、ES細胞に導入することによって相同組み替えを起こしたクローンを樹立した。この樹立したESクローンをマウス受精卵にmicroinjectionし、得たキメラマウスを野生型マウスと交配することによって現在へテロマウスを得ている。
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