本研究ではSema6D-plexin-A1相互作用の樹状細胞および破骨細胞に対する活性に注目し、昨年度、破骨細胞におけるplexin-A1下流のシグナル伝達経路へのFARP2の関与を見出した。本年度では、破骨細胞に焦点を当てて、plexin-A1下流のシグナル伝達経路におけるFARP2の機能解析を行った。 1、FARP2はC末端領域にsmall G protein Racの活性化ドメインを有する。そこで、破骨細胞分化過程におけるFARB2の機能をRacの活性を指標に検討した。RacのFRET probeを用いたFRET解析を行った結果、Racは破骨細胞分化過程で主にPodosomeと呼ばれる構造体に特に活性化が認められた一方、FARB2-Dominant Negative formを恒常的に発現するCell LineではそのようなPodosome様の構造体及びPodosomeでのRacの活性化は認められなかった。この結果から、FARP2が破骨細胞の分化過程において、Racの活性化に重要な機能を有する可能性が示唆された。 2、FARB2の生体内における機能を明らかにするために、FARP2遺伝子欠損マウスの作成を行った。樹立したFARP2欠損マウスの骨髄細胞を用いてin vitroにてRANKLで刺激し、破骨細胞分化誘導実験を行った。その結果、FARP2欠損細胞は野生型細胞に比べてsuboptimal doseでの破骨細胞分化が顕著に障害されていることが明らかになった。この結果から、FARP2が実際に破骨細胞分化に関与することが示唆された。
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