2009 年度研究成果報告書

3αヒドロキシステロイド脱水素酵素の構造学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	19790035
研究種目	若手研究(B)
配分区分	補助金
研究分野	物理系薬学
研究機関	大阪大学
研究代表者	中村昇太大阪大学, 微生物病研究所, 特任助教 (90432434)
研究期間 (年度)	2007 – 2009
キーワード	生物分子構造学
研究概要	本研究では、以前我々が結晶構造を決定したPseudomonas sp. B-0831株由来3α-hydroxysteroid dehydrogenase(Ps3αHSD)の基質結合ループの運動性と反応機構との関係を明らかにするために、100 nsecの分子動力学計算を行った。シミュレーション中において、NADHが結合しているホロ型のサブユニットの構造には変化がなかったが、アポ型においては基質結合ループが大きく開く運動を観測した。これらの観測結果から、変異実験を行い、188番のThrをAlaに変異させた変異体はNADH結合における、ヘリックスの誘起性と負の協同性が失われていることを見出した。これらの結果によって、基質結合ループの構造変化がPs3αHSDにNADH結合における負の協同性の特徴をもたらしていることが示唆された。