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本研究は、悪性化がん細胞を選択的に殺滅する副作用の少ない新規遺伝子治療法の確立のため、低酸素応答性転写因子によりP2X_7受容体(細胞外ATP依存性細胞死を誘導)を悪性がん細胞特異的に発現させ、高悪性化がん細胞を選択的に殺滅する新規遺伝子発現治療法の確立を目標としている。
本年度は、P2X_7受容体のがん成長への寄与を検討するため、P2X_7受容体をノックダウンしたメラノーマ株を作成し、がん成長・転移能への影響を検討した。B16メラノーマにP2X_7受容体に対するshRNAを遺伝子導入した。各細胞株のP2X_7受容体活性の測定は、小孔形成、細胞死誘導を指標とした。数十種のクローンの中からP2X_7受容体の発現が恒常的に低い細胞株を選択した(P2X_7-KD)。
P2X_7-KDをマウスの後肢に移植し、1ヶ月間腫瘍の成長を測定した。その結果、わずかにその増殖能が増加していることが明らかになった。しかし、移植しない状態でのin vitroでの増殖能には変化がなかった。一方、尾静脈よりP2X_7-KDを移植した結果、肺への生着が著しく増加することが示唆された。
以上の結果より、P2X_7受容体の発現低下は癌の悪性化に関与することが示され、P2X_7受容体を高発現させるがん遺伝子治療法の可能性が示された。今後、本研究の成果をもとにP2X_7受容体をがん細胞に発現させるベクターの作成、発現株の樹立、癌移植を行っていきたい。
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