寄生性原虫のリソソーム輸送における特殊性と多様性に関する解析

2007 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19790311
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 中野 由美子 (斉藤 由美子) 国立感染症研究所, 寄生動物部, 主任研究官 (30321764)
• キーワード: Rab / small GTPase / メンブレントラフィック / エンドソーム / リソソーム / 赤痢アメーバ / ファゴサイトーシス / 感染症

研究概要

赤痢アメーバ症は赤痢アメーバによって引き起こされる,下痢,大腸炎,肝膿瘍を主症状とする感染症であり,国内では年間700例の感染と,数例の死亡が報告される感染症法5類の感染症である。これまでの解析により,赤痢アメーバの主要な病原因子であるシステインプロテアーゼはリソソームに蓄積されており,リソソーム周辺の細胞内輸送機構がアメーバの病原性の理解に重要であることが報告されてきた。さらに近年の赤痢アメーバのゲノムプロジェクトの終了に伴い,リソソーム輸送に関与すると予想されるRab7 GTPaseが9種(7A-7I)赤痢アメーバゲノムに存在することが分かっている。リソソームへ輸送の複雑さの意義を明らかにする目的で,それぞれのRab7アイソタイプの特殊性を解析した。まず,定常状態におけるmRNAの発現量を定量PCRによって測定したところ,最も発現量が多かったのはRab7Hであり,その次にRab7A,7E,7B,7D,7Gの順に発現量が減少した。7C,7F,7Iの発現は定常状態では非常に少なかった。各Rab7アイソタイプの発現量は貪食刺激や肝膿瘍から単離した病原株では変化が見られなかった。さらにRab7Dの細胞内局在を検討したところ,Rab7Dは貪食刺激に伴って形成される前貪食胞上に貪食開始20-30分後に局在し,Rab7Aが前貪食胞に局在する時間(10分)よりも遅かった。さらに,Rab7Dの大量発現に伴って貪食効率が低下した。Rab7Dはリソソームに常に局在するRab7Bと異なり,リソソーム上に局在することは無かった。よって,Rab7DはRab7Aとは異なるステップで前貪食胞形成に関与し,貪食効率を負に調節する機能が有ることが推測された。

研究成果

• [雑誌論文] Two Rab7 isotypes,EnRab7A and EhRab7B,play distinct roles in biogenesis of lysosomes and phagosomes in the enteric protozoan parasite Entamoeba histolytica (2007)
  • 著者名/発表者名: Saito-Nakano, Y., Mitra, B. N., Nakada-Tsukui, K., Sato, D., Nozaki, T.
  • 雑誌名: Cell.Microbiol 9 ページ: 1796-1808
  • 査読あり
• [雑誌論文] RabllB small GTPase regulates secretion of cysteine proteases in the enteric protozoan parasite Entamieba histolytice (2007)
  • 著者名/発表者名: Mitra, B. N., Saito-Nakano, Y., Nakada-Tsukui, K., Sato, D., Nozaki, T
  • 雑誌名: Cell.Microbiol 9 ページ: 2112-2125
  • 査読あり
• [学会発表] Saito-Nakano, Y., Okada, M., Nozaki, TRole of Arf GTPase for pathogenesis in enteric protozoan parasite Enramoeba histolytica (2007)
  • 著者名/発表者名: Saito-Nakano, Y., Okada, M., Nozaki, T
  • 学会等名: 科学研究費補助金特定領域研究「メンブレントラフィツク、国際シンポジウム
  • 発表場所: 淡路夢舞台国際会議場
  • 年月日: 20071127-28
• [学会発表] 赤痢アメーバの病原機構におけるリソソーム形成とメンブレントラフィック (2007)
  • 著者名/発表者名: 中野 由美子、 岡田 麻美、 野崎 智義
  • 学会等名: 第6回分子寄生虫・マラリア研究フオーラム
  • 発表場所: 松山
  • 年月日: 20071027-28
• [学会発表] Role of cholesterol for pathogenesis in protozoan parasite Entamoe ba histolytica (2007)
  • 著者名/発表者名: Saito-Nakano, Y. and Nozaki, T
  • 学会等名: 第40回日本発生生物学会・第59回日本細胞生物学会合同大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20070528-30
• [図書] Advances in Parasitology 65:Structure and content of the Entamoebahistolytica genome (2007)
  • 著者名/発表者名: Clark, C.G., Hofer, M., Alsmark, U.C.M., Saito-Nakano, Y., Ali, V., Marion, S., Weber, C., Mukherjee, C., Bruchhaus, I., Tannich, E., Leippe, M., Sicheritz-Ponten, T., Foster, P.G., Noel, C.J., Hirt, R.P., Embley, T.M., Samuelson, J., Gilchrist, C.A., Mann B.J,. Singh, u., Bhattacharya, A.,Lohia, A.., Guillen, N.,Duchene,M., Nozaki, T., Hall N.
  • 総ページ数: 139
  • 出版者: Elsevier