研究課題
HIV薬剤感受性検査は遺伝子検査とは異なり耐性の程度を定量化、既知の耐性変異以外による耐性の検出ができる事から、迅速かつ簡便な検査法の確立が望まれている。しかし、日本では、HIV-1の取扱がBSL-3に限定される事から、HIV-1の薬剤感受性検査を行う事は非常に難しい。この研究では、薬剤耐性HIV-1の薬剤感受性検査をBSL-2施設にて簡便に効率良く行う事が出来る系の構築を目的とした。現在主に遺伝子導入実験に用いられているHIV-1 vectorはBSL-2での使用が可能である。本研究ではHIV-1 vectorのpol領域にHIV-1感染者由来の薬剤耐性HIV-1のpolをIn-Fusionクローニングシステムにより簡便に組み換える事が出来る様に改変し、HIV-1 vector感染の指標としてルシフェラーゼ遺伝子を組み込んだ。作製したHIV-1 vectorを感染させたMT-2細胞は、既存の抗HIV薬剤に対して薬剤濃度依存的なルシフェラーゼ活性低下を示した。一方プロテアーゼ阻害剤に耐性である84V/90Mの変異ウイルスにおいては、SQVでは2.0倍、NFVに対しては4.3倍の耐性を示した。核酸系逆転写酵素阻害剤耐性の41L/67L/70R/215Yおよび184V変異ウイルスにおいて、AZTおよび3TCに対してそれぞれ100倍以上の耐性を示した。非核酸系逆転写酵素阻害剤耐性の103N、190S変異ウイルスでは、NVPおよびEFVに対してそれぞれ10倍以上の耐性を示す事が確認された。HIV-1感染者血漿由来の薬剤耐性HIV-1のpol領域を用いて行った薬剤感受性検査においても、得られた感染者由来のHIV-1の薬剤耐性度は、Stanford大学のgenotypingシステムから推定された結果との相関が見られた。これらの結果から、HIV-1 vectorを用いた本薬剤感受性検査方法は、BSL-2におけるHIV-1薬剤感受性検査に利用可能であると考えられる。
すべて 2008
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J Thromb Thrombolysis. Oct;26(2)
ページ: 113-8
Ethiop. J. Health Biomed Sci. Sep;1(1)
ページ: 3-10
