|
A) 巣状糸球体硬化症に関わる新規「腎傷害因子」の探索
巣状糸球体硬化症再発患者血漿ならびにLDL-A吸着因子をイオン交換、逆相HPLCにより数百の分画に分離し、それぞれの画分に対する培養足細胞、メサンギウム細胞、尿細管細胞に対する反応性を、細胞内カルシウム・cAMP変化で検討し、活性因子を含む分画を同定、純化後、プロテインシークエンサーや質量分析機を用いて構造決定を行なった。培養足細胞に関しては、細胞内カルシウム変化を来す主成分はブラジキニンおよびヒドロキシプロリルブラジキニンであることが判明した。また、疾患再発時患者血漿中には高分子量キニノーゲンが正常コントロールおよび患者寛解期血漿中と比較して有意に多く含まれていた。現在その病態的意義に関して研究中である。
B) 糸球体細胞、尿細管細胞の機能維持に関わる新規「腎保護因子」の探索
動物組織抽出液を用いた因子の同定と解析
ラットおよびブタの組織を煮沸後、抽出液をアセトン沈殿し、その上清を分離し、凍結乾燥する。これをSP sepharoseカラム、ゲル濾過にて分画し、それぞれの画分に対する培養足細胞、メサンギウム細胞、尿細管細胞の反応性を指標に、活性因子を含む画分を同定し、HPLCを用いて新規生理活性因子の単離・同定を行なった。活性因子としては、既知のものとしてリジンバゾプレッシン、アルギニンバゾプレッシン、EGF、プロスタグランジンE2などが同定され、引き続き解析を続けている。
|
