|
本研究の目的は、ラットの慢性もしくは永久脳虚血モデルにおいて、間接血行再建術を用いた新生血管の誘導を評価することであり、間接血行再建術を行うと同時に新生血管の誘導に有利なtreatmentを行い、新生血管の誘導を促進出来るか否かを検討することである。
本年度は、昨年度に引き続き、ラット間接血行再建モデルにおいて、HIF(hypoxia-indudble factor)-1α naked DNAを用いて、新生血管の誘導を形態・機能の面から評価する事を目的とした。
先ずはラット間接血行モデルとして、pentobarbital腹腔内投与による麻酔下に右開頭・硬膜切開を行い、クモ膜に包まれた脳表に側頭筋を圧着させて閉創。その際、脳表にHIF-1α naked DNA100μgを散布し、新生血管の誘導が成されるかどうかを検討した。開頭後5もしくは10日目に、頚部内頚動脈分岐部より頭蓋内へ塞栓子を挿入することで、中大脳動脈永久閉塞を行い、翌日脳梗塞の評価を翌日に行った。新生血管の形態評価として、墨汁染色により確認される脳表からの血管を数・長さの面から評価した。新生血管の機能評価としては、側頭筋を付着させたままの全脳を取り出し2mm幅にスライスし、TTCにて反応させるとmitochondriaの欠損部すなわち脳梗塞巣が反応しないために白色のまま、正常脳の赤色部と明瞭に区別される。見出された梗塞巣はそのvolumeを算出することで定量化、control群と比較することが出来た。
また、本年度は、HIF下流にあるVEGFなどの新生血管促進因子について、PCRを用いて評価することも目指した。
現在論文投稿中である。
|
