| 研究概要 |
本研究は悪性グリオーマにおける腫瘍幹細胞に関する基礎的研究から発展させる方針にて、まず、手術摘出標本よりCD133陽性細胞、すなわち腫瘍幹細胞をマイクロマグネットビーズによる細胞抽出システムにて同細胞を抽出し、フローサイトメトリー、免疫染色、RT-PCRで抽出した細胞がCD133陽性細胞であるという確認を行った。このシステム自体を現在確立することができ、安定してCD133陽性細胞を悪性グリオーマより抽出できている。同方法にて採取された細胞を細胞株化することに成功しそれらはCD133抗原を発現している事を確認した。これらの細胞(GBM1, 2細胞)を使用し実験を進めた。現在、マウス脾臓からCD11陽性細胞を採取しこれをIL-4, MG-CSF存在下でCD133陽性細胞のcell lysateにてPulsingが進行中である。さらにこれらの細胞を用い今回われわれは同細胞をターゲットとした治療法の開発としてCD133陽性細胞一樹状細胞フュージョンワクチンの効果を確認するためにどうしても必要とされる脳腫瘍モデル(CD133陽性細胞をマウスの脳に移植し作成)を現時点で準備中である。一方で、今回樹立したCD133陽性細胞株(GBM1, 2細胞)を用いてボイデンチャンバーによるmigration assayを行っている。CD133陽性細胞はMCP1, HGF, SHH(sonic hedgehog)によってその遊走能が上昇することを現在見出している。GBM1, 2細胞においてPtchの下流分子であるSMO, Gli1, Gli2をsiRNAにてknock downすると対照群に比較しmaigration能が低下することを見出している
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