成長軟骨疾患の病因解明を目指した基礎的アプローチ

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19791018
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 整形外科学
• 研究機関: 大阪市立大学
• 研究代表者: 今井 祐記 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 病院講師 (10423873)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• キーワード: 核内受容体 / 軟骨 / 大腿骨頭すべり症

研究概要

骨軟骨組織における核内受容体高次機能解明を目的として、軟骨組織特異的核内受容体遺伝子欠損マウス作出するために、9型コラーゲン(Col9)遺伝子座にCreRecombinaseを挿入したCol9-Cre(CreERT2)ノックインマウス作出のためのTargeting Vectorを完成させたが、ES細胞に遺伝子導入した結果、遺伝子組み換え効率が非常に悪く、Southern blotting法による確認により、組み換え体のES細胞を得られなかった。そこで、従来のエレクトロポレーション法ならびにREDシステムによる遺伝子組み換えによるTargeting Vectorの作成から、Invitrogen社製、BP recombinaseおよびLR recombinaseを用いたTargeting Vector作成に切り替え、Targeting Vectorが完成し、すべての塩基配列を確認後、現在ES細胞への遺伝子導入により、組み換え体の作出を行っている段階であり、残念ながら報告時点で、Col9-Creノックインマウスの作出には至っていない。また、PPARγ floxマウスはバッククロスが進んでいる。

研究成果

• [雑誌論文] Parathyroid hormone enhances bone morphogenetic protein activity by increasing intracellular 3', 5'-cyclic adenosine monophosphate accumulation in osteoblastic MC3T3-E1 cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakao S, Koike T, Ohta Y, Manaka T, Imai Y, Takaoka K
  • 雑誌名: Bone (in press)
• [雑誌論文] RNA Interference for Noggin Enhances the Biological Activity of Bone Morphogenetic Proteins in vivo and in vitro (2009)
  • 著者名/発表者名: Takayama K, Suzuki A, Manaka T, Taguchi S, Hashimoto Y, Imai Y, Wakitani S, Takaoka K
  • 雑誌名: J Bone Miner Metab (in press)
• [雑誌論文] Osteoinductive Capacity and Heat Stability of Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein-2 Produced by Escherichia coli and Dimerized by Biochemical Processing (2009)
  • 著者名/発表者名: Yano K, Hoshino M, Ohta Y, Manaka T, Naka Y, Imai Y, Sebald W, Takaoka K
  • 雑誌名: J Bone Miner Metab (in press)
• [雑誌論文] Molecular Mechanisms Underlying the Effects of Sex Steroids on Bone and Mineral Metabolism (2009)
  • 著者名/発表者名: Imai Y, Nakamura T, Matsumoto T, Takaoka K, Kato S
  • 雑誌名: J Bone Miner Metab (in press)
• [雑誌論文] Estrogens Maintain Bone Mass by Regulating Expression of Genes Controlling Function and Life Span in Mature Osteoclasts (2008)
  • 著者名/発表者名: Imai Y, Youn MY, Kondoh S, Nakamura T, Kouzmenko A, Matsumoto T, Takada I, Takaoka K, Kato S
  • 雑誌名: Annals of New York Academy of Sciences (in press)
• [雑誌論文] Regulation of Bone Metabolism by Nuclear Receptors (2008)
  • 著者名/発表者名: Imai Y, Kondoh S, Kouzmenko A, Kato S
  • 雑誌名: Mol Cell Endocrinol (in press)
• [雑誌論文] Cyclic AMP enhances Smad-mediated BMP signaling through PKA-CREB (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohta Y, Nakagawa K, Imai Y, Katagiri T, Koike T, Takaoka K
  • 雑誌名: J Bone Miner Metab 26(5) ページ: 478-84
• [雑誌論文] A novel LMX1B nonsense mutation in a family with nail-patella syndrome. (2008)
  • 著者名/発表者名: Oshimo T, Fukai K, Higashi N, Kitano T, Imai Y, Shintaku H, Ishii M.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci 52(1) ページ: 57-60
• [雑誌論文] Cathepsin K-dependent toll-like receptor 9 signaling revealed in experimental arthritis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Asagiri M, Hirai T, Kunigami T, Kamano S, Gober HJ, Okamoto K, Nishikawa K, Latz E, Golenbock DT, Aoki K, Ohya K, Imai Y, Morishita Y, Miyazono K, Kato S, Saftig P, Takayanagi H.
  • 雑誌名: Science 319(5863) ページ: 624-7
• [雑誌論文] Estrogen prevents bone loss via estrogen receptor alpha and induction of Fasligand in osteoclasts (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakamura T*, Imai Y*, Matsumoto T, Sato S, Takeuchi K, Igarashi K, Harada Y, Azuma Y, Krust A, Yamamoto Y, Nishina H, Takeda S, Takayanagi H, Metzger D, Kanno J, Takaoka K, Martin TJ, Chambon P, Kato S. (*; These authors equally contributed to this work)
  • 雑誌名: Cell 130(5) ページ: 811-23
• [雑誌論文] Prostaglandin E2 EP4 agonist (ONO-4819) accelerates BMP-induced osteoblastic differentiation (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa K, Imai Y, Ohta Y, Takaoka K
  • 雑誌名: Bone 41(4) ページ: 543-8
• [雑誌論文] Calcanealapophyseal avulsion fracture (2007)
  • 著者名/発表者名: Imai Y, Kitano T, Nakagawa K, Takaoka K
  • 雑誌名: ArchOrthopTraumaSurg 127(5) ページ: 331-3
• [学会発表] 骨芽細胞におけるエストロゲンの作用の解明-骨芽細胞特異的エストロゲン受容体欠損マウスを用いて (2008)
  • 著者名/発表者名: 金藤紫乃, 今井祐記, 高田伊知郎, 中村貴, 松本高広, 加藤茂明
  • 学会等名: BMB2008
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20081209-14
• [学会発表] 思春期大腿骨頭変形に対する骨頭回転骨切り術 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 江口佳孝 高岡邦夫 北野利夫 中川敬介
  • 学会等名: 日本股関節学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20081205-06
• [学会発表] 成熟破骨細胞におけるエストロゲン受容体ERαの発現解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 延民榮 高田伊知郎 金藤紫乃 今井祐記 加藤茂明
  • 学会等名: 日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20081029-31
• [学会発表] 骨芽細胞におけるエストロゲンの直接作用-骨芽細胞特異的エストロゲン受容体欠損マウスの作出 (2008)
  • 著者名/発表者名: 金藤紫乃, 今井祐記, 高田伊知郎, 中村貴, 松本高広, 加藤茂明
  • 学会等名: 日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20081029-31
• [学会発表] 骨折後炎症期における骨折治癒のメカニズム (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 高岡邦夫
  • 学会等名: 日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20081029-31
• [学会発表] Estrogen Mediates Osteoprotective Effects by Controlling Osteoclast Life Cycle (2008)
  • 著者名/発表者名: Kato S, Imai Y, Nakamura T
  • 学会等名: 日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20081029-31
• [学会発表] 骨組織におけるアンドロゲン受容体機能解明 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 中村貴 金藤紫乃 松本高広 佐藤隆史 脇谷滋之 高岡邦夫 加藤茂明
  • 学会等名: 日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20081029-31
• [学会発表] ASBMR Annual Meeting Biochemical Characterization of ERα Co-regulators in Multinucleated Mature Osteoclasts (2008)
  • 著者名/発表者名: Takada I, Youn MY, Imai Y, Kato S
  • 学会等名: Montreal
  • 発表場所: CANADA
  • 年月日: 20080912-16
• [学会発表] ASBMR Annual Meeting Multinuclear Expression of ERα in Mature Osteoclasts (2008)
  • 著者名/発表者名: Youn MY, Takada I, Kondoh S, Imai Y, Kato S
  • 学会等名: Montreal
  • 発表場所: CANADA
  • 年月日: 20080912-16
• [学会発表] ASBMR Annual Meeting Osteoblastic Androgen Receptor Regulates Cortical Bone Mineral Density (2008)
  • 著者名/発表者名: Imai Y, Nakamura T, Matsumoto T, Inoue K, Kondoh S, Sato T, Takaoka K, Kato S
  • 学会等名: Montreal
  • 発表場所: CANADA
  • 年月日: 20080912-16
• [学会発表] 思春期臼蓋形成不全に対する治療法の選択 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記
  • 学会等名: 日本小児股関節研究会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20080627-28
• [学会発表] International Bone and Mineral Society Davos Workshop Sex Steroids Hormone Mediate Osteoprotecitve Effects by Controlling Osteoclast Life Cycle (2008)
  • 著者名/発表者名: Imai Y, Nakamura T, Matsumoto T, Sato S, Takeda S, Igarashi K, Yamamoto Y, Kanno J, Takaoka K, Martin TJ, Chambon P, Kato S
  • 学会等名: Davos
  • 発表場所: Swiss
  • 年月日: 20080309-14
• [学会発表] 破骨細胞特異的ERa-KO (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 中村 貴 高岡邦夫 加藤茂明
  • 学会等名: マウスにおける骨粗鬆症発症機構
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2008-06-21
• [学会発表] 閉経後骨粗鬆症の新たな分子メカニズム解明 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記
  • 学会等名: O2 カンファレンス
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2008-06-07
• [学会発表] エストロゲンによる骨量維持機構の分子基盤 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 中村貴 松本高広 高岡邦夫 加藤茂明
  • 学会等名: 日本内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 青森
  • 年月日: 2008-05-18
• [学会発表] SERM学術研究会学術集会 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 中村貴 松本高広 高岡邦夫 加藤茂明
  • 学会等名: 閉経後骨粗鬆症の分子メカニズム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-05-10
• [学会発表] 生物学的骨癒合促進法 (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 高岡邦夫
  • 学会等名: 骨折治療を考える会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2008-03-01
• [学会発表] Bone Research Seminar Estrogen Prevents Bone Loss via Estrogen Receptor Alpha and Induction of FasLigand in Osteoclast (2008)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-02-29
• [学会発表] 閉経後骨粗鬆症の分子基盤解明 (2007)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 中村貴 松本高広 竹田秀 高岡邦夫 加藤茂明
  • 学会等名: BMB2007(第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会合同大会)
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-14
• [学会発表] エストロゲンはFasLigndシグナルによる破骨細胞寿命の調節により骨量を維持する (2007)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 中村貴 竹田秀 高岡邦夫 松本高広 加藤茂明
  • 学会等名: 日本整形外科学会基礎学術集会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2007-10-26
• [学会発表] 骨折治癒におけるBMPの役割 (2007)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 寺井秀富 高岡邦夫
  • 学会等名: 日本整形外科学会基礎学術集会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2007-10-25
• [学会発表] ASBMR Sex Steroids Hormone Receptors in Osteoclasts Mediate Osteoprotecitve Effects by Regulating Its Life Cycle (2007)
  • 著者名/発表者名: 22Yuuki Imai, Takashi Nakamura, Takahiro Matsumoto, Shu Takeda, Katsuhide Igarashi, Toru Fukuda, Yoko Yamamoto, Jun Kanno, Kunio Takaoka, Pierre Chambon, Shigeaki Kato
  • 発表場所: Honolulu, USA,
  • 年月日: 2007-09-19
• [学会発表] Bone Biology Forum Estrogen receptor α mediates the osteoprotective estrogen action by controlling the life cycle of osteoclast through Fasligand signaling (2007)
  • 著者名/発表者名: 23Yuuki Imai, Takashi Nakamura, Takahiro Matsumoto and Shigeaki Kato
  • 発表場所: Susono
  • 年月日: 2007-08-25
• [学会発表] 核内受容体の破骨細胞特異的ノックアウトマウス (2007)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 中村貴 松本高広 加藤茂明
  • 学会等名: 日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2007-07-21
• [学会発表] エストロゲンの骨量維持機構はFasLigndシグナルを介した破骨細胞寿命の調節である (2007)
  • 著者名/発表者名: 今井祐記 中村貴 竹田秀 福田亨 山本陽子 高岡邦夫 松本高広 加藤茂明
  • 学会等名: 日本骨代謝学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2007-07-21
• [図書] 栄養学研究の最前線2008核内性受容体群による骨代謝制御の分子機構 (2008)
  • 著者名/発表者名: 加藤茂明, 高田伊知郎, 中村貴, 山本陽子, 今井祐記
  • 総ページ数: 45-55
  • 出版者: 建帛社
• [備考] 2009 IBMS-ANZBMS Young Investigator Travelling Award
• [備考] 2008 Young Investigator Travelling Grant Award, International Bone and Mineral Society Davos Workshop
• [備考] 2008日本骨代謝学会IBMS-ANZBMS 2009 Travel Award
• [備考] 2007日本骨代謝学会奨励賞(Encouragement Award)
• [備考]
  • URL: http://www.iam.u-tokyo.ac.jp/bnsikato/
• [備考]
  • URL: http://medwebsv.med.osaka-cu.ac.jp/orthoped/index.html