| 研究概要 |
前年度の研究で,ラット下垂体前葉初代培養細胞を実験モテルとして用いて,細胞増殖に対するエストロジェンの抑制作用のメカニズムを解明するために,DNAマイクロアレイによる遺伝子発現解析を行い,遺伝子発現が変化した複数の遺伝子を見出したため,さらにreal time reverse transcription(RT)-PCR法により,確認実験を行った。
また,この遺伝子発現解析により見出した,エストロジェンの抑制作用に伴い発現量が減少する遺伝子を発現させるために,アデノウィルスベクターを作成した。
プロラクチン(PRL)産生初代培養細胞の増殖に対するアデノウィルス感染の影響を検討するため,非増殖性アデノウィルス(ΔE1,E3)から,テトラサイクリン誘導性にβgalを発現するベクター(Ad-Tet.On+Ad-TRE/βgal),蛋白非発現ベクター(Ad-emp)を作成し,ラット無血清培養下垂体細胞に感染させた。Ad-Tet.On+Ad-TRE/βgalの感染は,PRL細胞の基礎増殖を促進したが,増殖に対するforskolin(FK),IGF-1単独の作用およびIGF-1存在下のestradiolの抑制作用には影響を及ぼさなかった。基礎増殖の促進は,Ad-CMV/LucだけではなくAd-emp感染によっても見られたことから,アデノウィルス感染自身によることが示された。
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