研究課題
核内蛋白の動向からみた口腔顎顔面領域の悪性腫瘍細胞におけるアポトーシスの誘導経路についてさらに検討している。CDDP、MMC、DXR等の頭頸部領域で用いられる抗癌剤やUV照射により悪性腫瘍細胞にアポトーシスを誘導した。アポトーシスの誘導に伴い正常細胞では核小体相当部位で強力にドット状に反応するAgNORsは分解され、核小体相当部位での強力反応は消失した。さらにはNORs構成蛋白の一つであるnucleolinは免疫蛍光染色によりAgNORsと同様な変化をした。nucleophosminについても同様の細胞内局在の変化を示した。鍍銀染色を用いたウエスタンブロッティング変法、抗体を用いたウエスタンデロッティングでは110kDaの蛋白がアポトーシス誘導に伴い95kDaと80kDaの蛋白に4分解された。変法と抗nucleolin抗体を用いたウエスタンブロッティングにおける分解が完全に一致した。またmcleolhinの動向がアポトーシスの指標となりうるものであり、悪性腫瘍の予後判定への適用につながるという面においても非常に意義のある結果となっている。nucleohの変化が遺伝子レベルで調節されているかどうかを調べる為、半定量PCR法を施行したが、アポトーシス誘導に伴う明らかなmRNAレベルの変化は認められなかった。この変化は翻訳後レベルで行われていると考えられる。現在、RNAiを用いた実験系を構築中であり、各種細胞における至適トランスフェクション条件が判明してきている。nucleolinのみではなくその関連蛋白を中心に、核内蛋白のアポトーシス実行機構との関わりについてさらに検討中である。また、癌幹細胞の概念との関わりから配布の始まったips細胞使用を視野に入れた実験系を構築中である。
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