尾索動物カタユウレイボヤは、哺乳類における生殖細胞形成のモデル動物として注目されている。本研究では、本種の生殖細胞マーカー系統をゲノム編集により作製しようと試みた。生殖細胞関連遺伝子TDRD7を標的とした人工ヌクレアーゼTALENを作製し、TDRD7上下流領域約1kbpを増幅し蛍光タンパク質遺伝子gfpに繋げたDNA断片とともにホヤ卵に注入した。TALENによるTDRD7標的配列のDNA二重鎖切断と相同組換修復によりTDRD7がgfpに置き替わるノックインを期待した。結果として始原生殖細胞にGFPが発現し、またgfpのノックインを確認した。系統作製実現には、さらに効率をあげる必要がある。
|