細胞間相互作用に着目したNASHの発症・進展機構の解明と医学応用

2021 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19H01054
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 小川 佳宏 九州大学, 医学研究院, 教授 (70291424)
• 研究分担者: 国府島 庸之 九州大学, 医学研究院, 准教授 (00650748) ; 宮澤 崇 九州大学, 大学病院, 講師 (30443500)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: NASH / 細胞間相互作用 / hCLS / マクロファージ / ミトコンドリア / C型レクチン受容体 / 一細胞遺伝子発現解析

研究実績の概要

昨年度までにhCLSを形成するマクロファージで高発現するC型レクチン受容体Dectin-2欠損マウスとNASHマウスを交配したダブルノックアウト（DKO）マウスで肝細胞死が抑制されている可能性が示唆されたため、高脂肪食負荷の期間を長くして検討したが、DKOマウスと対照マウスでは肝線維化や肝癌の発生に有意な差を認めなかった。一方、DKOマウスでは糖負荷試験により、著しい糖代謝の悪化が認められた。全身のインスリン抵抗性に差はなく、単離膵島を用いた検討ではグルコース応答性インスリン分泌が低下していたため、Dectin-2欠損マウスでは膵臓におけるβ細胞機能の低下により糖代謝が増悪する可能性が示唆された。

NASHの発症・進展における肝細胞死とERストレス、ミトコンドリア機能障害の時空間的関連を明らかにするため、NASHマウスの肝臓を経時的にサンプリングし、関連因子の発現変化を確認した。NASHマウスでは高脂肪食負荷5週目より脂肪蓄積が認められ、10週目には肝細胞死から炎症を生じ、15週目には肝線維化が認められた。NASHの進展に応じてオートファジーに関連するP62の蛋白発現が増加することが明らかになった。

NASHの肝臓における炎症細胞社会の空間的変化の解析のため、NASHマウスに蛍光標識した抗体を経静脈的に投与し、肝臓を未固定・未凍結のまま薄切してhCLSを同定した。マイクロダイセクション法により、hCLS周辺領域を分離して非実質細胞を回収し、免疫染色により十分量の伊東細胞、類洞内皮細胞、マクロファージを中心とした炎症細胞により構成されていることが確認された。一細胞遺伝子発現解析に使用するライブラリー作製を試みたが、十分量のcDNAが得られず、細胞回収・分散の条件を再検討している。

現在までの達成度 (段落)

令和3年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和3年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Differential effect of canagliflozin, a sodium?glucose cotransporter 2 (SGLT2) inhibitor, on slow and fast skeletal muscles from nondiabetic mice (2022)
  • 著者名/発表者名: Otsuka Hiroko、Yokomizo Hisashi、Nakamura Shintaro、Izumi Yoshihiro、Takahashi Masatomo、Obara Sachiko、Nakao Motonao、Ikeda Yosuke、Sato Naoichi、Sakamoto Ryuichi、Miyachi Yasutaka、Miyazawa Takashi、Bamba Takeshi、Ogawa Yoshihiro
  • 雑誌名: Biochemical Journal 巻: 479 ページ: 425～444
  • DOI: 10.1042/BCJ20210700
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pirfenidone attenuates acetaminophen-induced liver injury via suppressing c-Jun N-terminal kinase phosphorylation (2022)
  • 著者名/発表者名: Tashiro Shigeki、Tanaka Masatake、Goya Takeshi、Aoyagi Tomomi、Kurokawa Miho、Imoto Koji、Kuwano Akifumi、Takahashi Motoi、Suzuki Hideo、Kohjima Motoyuki、Kato Masaki、Ogawa Yoshihiro
  • 雑誌名: Toxicology and Applied Pharmacology 巻: 434 ページ: 115817～115817
  • DOI: 10.1016/j.taap.2021.115817
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Efficacy of Tofogliflozin on Metabolic Dysfunction-Associated Fatty Liver Disease (2022)
  • 著者名/発表者名: Goya Takeshi、Imoto Koji、Tashiro Shigeki、Aoyagi Tomomi、Takahashi Motoi、Kurokawa Miho、Suzuki Hideo、Tanaka Masatake、Kato Masaki、Kohjima Motoyuki、Ogawa Yoshihiro
  • 雑誌名: Gastroenterology Insights 巻: 13 ページ: 20～26
  • DOI: 10.3390/gastroent13010003
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] メタボリックシンドロームにおけるマクロファージの役割 (2022)
  • 著者名/発表者名: 内田尚宏、宮澤 崇、小川佳宏
  • 雑誌名: 実験医学・増刊 巻: 40 ページ: 74～79
• [雑誌論文] Non-alcoholic fatty liver disease in mice with hepatocyte-specific deletion of mitochondrial fission factor (2021)
  • 著者名/発表者名: Takeichi Yukina、Miyazawa Takashi、Sakamoto Shohei、Hanada Yuki、Wang Lixiang、Gotoh Kazuhito、Uchida Keiichiro、Katsuhara Shunsuke、Sakamoto Ryuichi、Ishihara Takaya、Masuda Keiji、Ishihara Naotada、Nomura Masatoshi、Ogawa Yoshihiro
  • 雑誌名: Diabetologia 巻: 64 ページ: 2092～2107
  • DOI: 10.1007/s00125-021-05488-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Machine learning based models for prediction of subtype diagnosis of primary aldosteronism using blood test (2021)
  • 著者名/発表者名: Kaneko Hiroki、Umakoshi Hironobu、Ogata Masatoshi、Wada Norio、Iwahashi Norifusa、Fukumoto Tazuru、Yokomoto-Umakoshi Maki、Nakano Yui、Matsuda Yayoi、Miyazawa Takashi、Sakamoto Ryuichi、Ogawa Yoshihiro
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 11 ページ: 9140
  • DOI: 10.1038/s41598-021-88712-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Metabolic Alteration in Hepatocellular Carcinoma: Mechanism of Lipid Accumulation in Well-Differentiated Hepatocellular Carcinoma (2021)
  • 著者名/発表者名: Suzuki Hideo、Kohjima Motoyuki、Tanaka Masatake、Goya Takeshi、Itoh Shinji、Yoshizumi Tomoharu、Mori Masaki、Tsuda Mariko、Takahashi Motoi、Kurokawa Miho、Imoto Koji、Tashiro Shigeki、Kuwano Akifumi、Kato Masaki、Okada Seiji、Nakamuta Makoto、Ogawa Yoshihiro
  • 雑誌名: Canadian Journal of Gastroenterology and Hepatology 巻: 2021 ページ: 1～13
  • DOI: 10.1155/2021/8813410
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Iron-rich Kupffer cells exhibit phenotypic changes during the development of liver fibrosis in NASH (2021)
  • 著者名/発表者名: Kanamori Yohei、Tanaka Miyako、Itoh Michiko、Ochi Kozue、Ito Ayaka、Hidaka Isao、Sakaida Isao、Ogawa Yoshihiro、Suganami Takayoshi
  • 雑誌名: iScience 巻: 24 ページ: 102032～102032
  • DOI: 10.1016/j.isci.2020.102032
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The sodium-glucose cotransporter-2 inhibitor Tofogliflozin prevents the progression of nonalcoholic steatohepatitis?associated liver tumors in a novel murine model (2021)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka Naoki、Tanaka Miyako、Ochi Kozue、Watanabe Akiko、Ono Kenji、Sawada Makoto、Ogi Tomoo、Itoh Michiko、Ito Ayaka、Shiraki Yukihiro、Enomoto Atsushi、Ishigami Masatoshi、Fujishiro Mitsuhiro、Ogawa Yoshihiro、Suganami Takayoshi
  • 雑誌名: Biomedicine & Pharmacotherapy 巻: 140 ページ: 111738～111738
  • DOI: 10.1016/j.biopha.2021.111738
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Role of chronic inflammation in the pathogenesis of nonalcoholic steatohepatitis: lessons from a unique mouse model using melanocortin receptor-deficient mice (2021)
  • 著者名/発表者名: Itoh Michiko、Suganami Takayoshi、Ogawa Yoshihiro
  • 雑誌名: Endocrine Journal 巻: 68 ページ: 743～749
  • DOI: 10.1507/endocrj.EJ21-0002
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 生活習慣病と慢性炎症 (2022)
  • 著者名/発表者名: 小川佳宏
  • 学会等名: 第56回糖尿病学の進歩（松山）（WEB開催）
  • 招待講演
• [学会発表] 非アルコール性脂肪肝炎の発症・進展におけるミトコンドリアダイナミクスの病態生理的意義 (2021)
  • 著者名/発表者名: 武市幸奈, 宮澤 崇, 坂本昌平, 藤原俊亮, 松田やよい, 坂本竜一, 野村政壽, 小川佳宏
  • 学会等名: 第94回日本内分泌学会学術総会（群馬）（WEB開催）
• [学会発表] 非アルコール性脂肪性肝疾患の組織学的特徴に関連した臨床病態および遺伝子発現変化の検討 (2021)
  • 著者名/発表者名: 井本効志、田代茂樹、日置智惟、川元美緒、高橋 基、黒川美穂、鈴木秀生、合谷 孟、田中正剛、加藤正樹、国府島庸之、小川佳宏
  • 学会等名: 第57回日本肝臓学会総会（札幌）（WEB開催）
• [学会発表] 肝細胞癌における糖・脂質代謝関連遺伝子発現の変化：高分化型肝細胞癌における脂肪蓄積のメカニズム (2021)
  • 著者名/発表者名: 鈴木秀生、高橋 基、井本効志、黒川美穂、田代茂樹、合谷 孟、田中正剛、加藤正樹、伊藤心二、吉住朋晴、森 正樹、中牟田誠、国府島庸之、小川佳宏
  • 学会等名: 第57回日本肝臓学会総会（札幌）（WEB開催）
• [備考] 九州大学大学院医学研究院病態制御内科学（第三内科）
  • URL: https://www.intmed3.med.kyushu-u.ac.jp/