| 研究課題/領域番号 |
19H01063
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
西田 幸二 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (40244610)
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| 研究分担者 |
辻川 元一 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (70419472)
林 竜平 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座教授 (70535278)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | 器官発生 / オルガノイド / iPS細胞 / SEAM / 疾患特異的 |
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| 研究実績の概要 |
本研究ではヒト器官形成時における各組織のクロストークメカニズムを解明する事を目的とする。具体的には、SEAM自体がどのようなメカニズムによって 発生してくるかを検討す。SEAMでは発生系譜の違う細胞、組織原基が同心円状に配置する。この発生段階における時間的空間的遺伝子発現の解析やCRISPRを用いた発現制御や特異的阻害を用いた研究によって、SEAMの同心円構造構築にかかわるシグナル経路の同定をおこなう。これにより、ヒトの器官形成における根源的なシグナルメカニズムの同定ができると考えている。次に、SEAM形成という表現型を利用してヒト眼球形成異常の疾患特異的iPS細胞を利用する他、化学的変異導入を用いたヒト器官を対象とした初めてのForward Geneticsを以下の通りおこなう。
昨年度においては iPS細胞におけるENU（Nニトロソウレア）による変異誘導を昨年行い多くの変異株を得たうえで、それぞれに対してSEAM誘導を行い、その異常を起こす92株の同定をおこなった。これらの異常は表現型により５つほどのパターンに分類され、我々はそれらのうち、２層の発生が不良で異常になるもの、３層の形状に異常をきたすものについて、全ゲノムシークエンスを行い、複数の遺伝子に変異を認めた。これを、現在までのゲノムアノテーションと比較し、原因遺伝子変異と思えるものから順に解析を開始し、その一つの遺伝子についてCRSPRによるノックアウト体を解析するとともにmRNAseqを行った。
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| 現在までの達成度 (段落) |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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