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2019 年度 実績報告書

再生医療を革新的に効率化する機能性バイオ界面の創製

研究課題

研究課題/領域番号 19H02447
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

長瀬 健一  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 准教授 (10439838)

研究分担者 金澤 秀子  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 教授 (10240996)
綾野 絵理  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 研究員 (10424102)
研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2023-03-31
キーワード温度応答性界面 / 機能性インターフェイス / 細胞分離 / バイオセパレーション / 再生医療 / 組織工学 / バイオマテリアル
研究実績の概要

本研究は、再生医療に用いる細胞組織を作製するための機能性バイオインターフェイスの開発を目的としている。
令和元年度は、標的細胞を温度応答性高分子であるポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)(PNIPAAm)に電荷を導入したバイオインターフェイスによる細胞分離の機能の開発に焦点を当てて研究を推進した。
温度応答性高分子PNIPAAmに負電荷を有するアクリル酸(Acrylic acid: AAc)と、疎水性を有するtert-ブチルアクリルアミド(tert-ブチルアクリルアミド: tBAAm)を共重合したP(NIPAAm-co-AAc-co-tBAAm)を高密度なブラシ状に修飾したガラス基板を用いた細胞分離の検討を行った。血管を構成する細胞である血管内皮細胞(HUVEC)と平滑筋細胞(SMC)を用いた分離の検討を行ったところ、37℃で、負電荷を有する温度応答性高分子ブラシにSMCの接着が促進され、20℃でHUVECの脱着が促進される傾向が見られた。この特性を利用して、温度変化だけでHUVECとSMCの分離を達成することができた。
また、同様に正電荷を有するN,N-ジメチルアクリルアミド(DMAPAAm)をPNIPAAmと共重合した温度応答性高分子ブラシを用いた間葉系幹細胞(MSC)の分離についても着手している。ガラス基板に正電荷を有するDMAPAAmを重合し、その後、NIPAAmを重合することで、PDMAPAAm-b-PNIPAAmを構築した。作製したPDMAPAAm-b-PNIPAAm修飾ガラス基板にMSCを播種したところ、37℃、20℃で他の細胞と異なる挙動を示した。これにより、温度変化のみでのMSCの精製に応用可能な事が示された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本研究課題では、初年度および二年目に温度応答性高分子を用いた機能性界面の構築とそれを用いた細胞分離について計画していた。温度応答性高分子に負電荷を有するアクリル酸を共重合したP(NIPAAm-co-AAc-co-tBAAm)の構築と血管構成細胞を用いた細胞分離、および、正電荷を有するDMAPAAmを温度応答性高分子に導入したPDMAPAAm-b-PNIPAAmを構築と間葉系幹細胞の分離を達成することができた。
これらの理由より当初の計画どおり順調に進捗しているといえる。

今後の研究の推進方策

令和二年度は、引き続き温度応答性高分子を用いた機能性バイオインターフェイスの設計を行なう。標的細胞を特異的に接着させる因子を機能性バイオインターフェイスへと導入し、細胞分離の精度を向上させる。さらに、細胞組織の作製を可能にする機能性バイオインターフェイスの開発にも着手する。

  • 研究成果

    (19件)

すべて 2020 2019

すべて 雑誌論文 (6件) (うち国際共著 1件、 査読あり 6件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (13件) (うち国際学会 6件)

  • [雑誌論文] Thermoresponsive anionic copolymer brush-grafted surfaces for cell separation2020

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Uchikawa Naho、Hirotani Tadashi、Akimoto Aya Mizutani、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Colloids and Surfaces B: Biointerfaces

      巻: 185 ページ: 110565~110565

    • DOI

      10.1016/j.colsurfb.2019.110565

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mixed polymer brush as a functional ligand of silica beads for temperature-modulated hydrophobic and electrostatic interactions2020

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Kitazawa Sakiko、Yamada Sota、Akimoto Aya Mizutani、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Analytica Chimica Acta

      巻: 1095 ページ: 1~13

    • DOI

      10.1016/j.aca.2019.10.058

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Characteristic differences of cell sheets composed of mesenchymal stem cells with different tissue origins2019

    • 著者名/発表者名
      Nakao Mitsuyoshi、Inanaga Daimu、Nagase Kenichi、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Regenerative Therapy

      巻: 11 ページ: 34~40

    • DOI

      10.1016/j.reth.2019.01.002

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Phenotypic traits of mesenchymal stem cell sheets fabricated by temperature-responsive cell culture plate: structural characteristics of MSC sheets2019

    • 著者名/発表者名
      Nakao Mitsuyoshi、Kim Kyungsook、Nagase Kenichi、Grainger David W.、Kanazawa Hideko、Okano Teruo
    • 雑誌名

      Stem Cell Research & Therapy

      巻: 10 ページ: 353~353

    • DOI

      10.1186/s13287-019-1431-6

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Temperature-responsive mixed-mode column containing temperature-responsive polymer-modified beads and anionic polymer-modified beads2019

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Watanabe Maria、Zen Fumihiko、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Analytica Chimica Acta

      巻: 1079 ページ: 220~229

    • DOI

      10.1016/j.aca.2019.06.010

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Temperature-modulated cell-separation column using temperature-responsive cationic copolymer hydrogel-modified silica beads2019

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Inanaga Daimu、Ichikawa Daiju、Mizutani Akimoto Aya、Hattori Yutaka、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Colloids and Surfaces B: Biointerfaces

      巻: 178 ページ: 253~262

    • DOI

      10.1016/j.colsurfb.2019.02.057

    • 査読あり
  • [学会発表] 温度応答性高分子ブラシ修飾ビーズを用いた間葉系幹細胞分離カラムの開発2019

    • 著者名/発表者名
      枝常吾郎, 長瀬健一, 金澤秀子
    • 学会等名
      第 26 回クロマトグラフィーシンポジウム
  • [学会発表] 温度応答性カチオン交換型ミックスモードカラムの開発2019

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 渡辺真梨亜, 善 文比古, 金澤秀子
    • 学会等名
      第32回バイオメディカル分析科学シンポジウム
  • [学会発表] 温度応答性ミックスモードカラムの開発と特性評価2019

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 渡辺真梨亜, 善 文比古, 金澤秀子
    • 学会等名
      日本分析化学会第68年会
  • [学会発表] 正電荷を有する温度応答性高分子修飾ビーズを充填剤とした細胞分離カラムの開発2019

    • 著者名/発表者名
      稲永大夢, 市川大樹, 山田創太, 長瀬健一, 服部 豊, 金澤秀子
    • 学会等名
      日本分析化学会第68年会
  • [学会発表] 選択的細胞接着性ペプチドおよび温度応答性高分子を用いた細胞分離法の開発2019

    • 著者名/発表者名
      志村昌紀, 花屋賢悟, 山田創太, 長瀬健一, 金澤秀子
    • 学会等名
      日本分析化学会第68年会
  • [学会発表] Thermoresponsive Cell Separation Using Cell Adhesion Peptides2019

    • 著者名/発表者名
      Masaki Shimura, Kengo Hanaya, Sota Yamada, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      RSC-Tokyo International Conference 2019
    • 国際学会
  • [学会発表] New cell separation method using the thermoresponsive surface modified with cell adhesion peptides2019

    • 著者名/発表者名
      Masaki Shimura, Kengo Hanaya, Yuki Hiruta, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      HPLC2019 Milan
    • 国際学会
  • [学会発表] Development of Label-free Stem Cell Separation System Using Mixed Polymer Brush Consisting of Thermo-responsive and Cationic Polymers2019

    • 著者名/発表者名
      Haruno Wakayama, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      HPLC2019 Milan
    • 国際学会
  • [学会発表] 細胞分離を目的とした温度応答性高分子の精密設計2019

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 金澤秀子
    • 学会等名
      第68回高分子討論会
  • [学会発表] 温度応答型アニオン性ポリマーブラシを用いた細胞分離の検討2019

    • 著者名/発表者名
      長瀬 健一, 内川 奈保, 廣谷 正, 秋元 文, 金澤 秀子
    • 学会等名
      第41回日本バイオマテリアル学会大会
  • [学会発表] Cell Separation Column using Temperature Responsive Cationic Copolymer Modified Beads2019

    • 著者名/発表者名
      Kenichi Nagase, Daimu Inanaga, Goro Edatsune, Yuki Nagata, Mizutani Akimoto Aya, Kanazawa Hideko
    • 学会等名
      Materials Research Meeting 2019 (MRM2019)
    • 国際学会
  • [学会発表] New Cell Separation System using Mixed Temperature-responsive and Cationic Polymer Brushes2019

    • 著者名/発表者名
      Haruno Wakayama, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      Materials Research Meeting 2019 (MRM2019)
    • 国際学会
  • [学会発表] Stem Cell Separation Column using Temperature-responsive Cationic Copolymer Brushes Modified Beads2019

    • 著者名/発表者名
      Goro Edatsune, Sota Yamada, Kenichi Nagase, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      HPLC 2019 Kyoto
    • 国際学会

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公開日: 2021-01-27  

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