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2021 年度 実績報告書

再生医療を革新的に効率化する機能性バイオ界面の創製

研究課題

研究課題/領域番号 19H02447
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

長瀬 健一  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 准教授 (10439838)

研究分担者 綾野 絵理  慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 研究員 (10424102)
研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2023-03-31
キーワード温度応答性高分子 / 機能性界面 / バイオ界面 / 細胞分離 / 細胞組織
研究実績の概要

本研究は、再生医療に用いる細胞組織を作製するための機能性バイオインターフェイスの開発を目的としている。
令和三年度は、温度応答性高分子であるポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)(PNIPAAm)に細胞認識ペプチドを導入したバイオインターフェイスによる細胞分離の機能開発および細胞組織を作製する研究を推進した。
下層にペプチド結合部位としてpoly(2-hydroxyethyl methacrylate-co-propargyl acrylate) (poly(HEMA- co -PgA))、上層に温度応答性部位としてpoly(NIPAAm-co-HEMA)を有するブロックコポリマーをガラス基板に修飾した。この高分子に血管内皮細胞選択的な接着活性を示すArg-Glu-Asp-Val (REDV)ペプチドを導入した。作製したガラス基板をペトリディッシュに固定化し、モデル細胞として血管を構成するヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)、ヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)、大動脈平滑筋細胞(AoSMC)を37℃で播種したところ、HUVECのみが接着した。さらに温度を20℃に下げることで接着したHUVECを回収することができた。この特性を利用して、温度変化だけでHUVECの分離を達成することができた。
また、PNIPAAm修飾基板を用いた間葉系幹細胞組織の作製に着手している。細胞播種密度やタンパク質吸着量を適切に制御することで効率的に細胞組織を作製することができた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当該年度に予定していた細胞認識因子を温度応答性高分子に導入した高分子ブラシ界面を構築することができた。さらに、間葉系幹細胞組織作製の条件検討にも着手することができた。これらの理由より当初の計画どおり順調に進捗しているといえる。

今後の研究の推進方策

令和四年度は、温度応答性高分子を用いた機能性バイオインターフェイスの設計を行なう。標的細胞を特異的に接着させるペプチド、荷電性官能基を温度応答性高分子に導入した機能性バイオインターフェイスを作製し、細胞分離の精度を向上させる。さらに、高機能化した間葉系幹細胞組織の作製を可能にする機能性バイオインターフェイスの開発にも着手する。

  • 研究成果

    (55件)

すべて 2022 2021

すべて 雑誌論文 (9件) (うち査読あり 9件、 オープンアクセス 5件) 学会発表 (46件) (うち国際学会 8件、 招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Viral vector purification with thermoresponsive-anionic mixed polymer brush modified beads-packed column2022

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Kitazawa Sakiko、Kogure Toshihiko、Yamada Sota、Katayama Kazuhiro、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Separation and Purification Technology

      巻: 286 ページ: 120445~120445

    • DOI

      10.1016/j.seppur.2022.120445

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Two-dimensional temperature-responsive chromatography using a poly(N-isopropylacrylamide) brush-modified stationary phase for effective therapeutic drug monitoring2022

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Inoue So、Inoue Masakazu、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 12 ページ: 2653

    • DOI

      10.1038/s41598-022-06638-1

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Temperature-responsive mixed-mode column for the modulation of multiple interactions2022

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Matsumoto Kosuke、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 12 ページ: 4434

    • DOI

      10.1038/s41598-022-08475-8

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Effective Separation for New Therapeutic Modalities Utilizing Temperature-responsive Chromatography2021

    • 著者名/発表者名
      Maekawa Yutaro、Ayano Eri、Nagase Kenichi、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Analytical Sciences

      巻: 37 ページ: 651~660

    • DOI

      10.2116/analsci.20SCR09

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effect of pore diameter on the elution behavior of analytes from thermoresponsive polymer grafted beads packed columns2021

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Umemoto Yuta、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 11 ページ: 9976

    • DOI

      10.1038/s41598-021-89165-9

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Temperature-responsive spin column for sample preparation using an all-aqueous eluent2021

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Ishizawa Yuta、Inoue Masakazu、Kokubun Matsurika、Yamada Sota、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Analytica Chimica Acta

      巻: 1179 ページ: 338806~338806

    • DOI

      10.1016/j.aca.2021.338806

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Thermoresponsive interfaces obtained using poly(N-isopropylacrylamide)-based copolymer for bioseparation and tissue engineering applications2021

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi
    • 雑誌名

      Advances in Colloid and Interface Science

      巻: 295 ページ: 102487~102487

    • DOI

      10.1016/j.cis.2021.102487

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Thermally-modulated cell separation columns using a thermoresponsive block copolymer brush as a packing material for the purification of mesenchymal stem cells2021

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Edatsune Goro、Nagata Yuki、Matsuda Junnosuke、Ichikawa Daiju、Yamada Sota、Hattori Yutaka、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Biomaterials Science

      巻: 9 ページ: 7054~7064

    • DOI

      10.1039/D1BM00708D

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Temperature responsive chromatography for therapeutic drug monitoring with an aqueous mobile phase2021

    • 著者名/発表者名
      Nagase Kenichi、Nishiyama Teruno、Inoue Masakazu、Kanazawa Hideko
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 11 ページ: 23508

    • DOI

      10.1038/s41598-021-02998-2

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 肝細胞認識高分子と温度応答性高分子による肝細胞分離法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      小島直人, 長瀬健一, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤秀子
    • 学会等名
      第81回分析化学討論会
  • [学会発表] 細胞移植効率化を目的とした細胞増殖因子徐放ナノ粒子の開発2021

    • 著者名/発表者名
      永岡真凜, 中野雄斗, 山田創太, 鵜頭理恵, 長瀬健一, 金澤秀子
    • 学会等名
      第81回分析化学討論会
  • [学会発表] 温度応答性スピンカラムを用いた血清試料の除タンパク法の検討2021

    • 著者名/発表者名
      井上正和, 石澤佑太, 長瀬健一, 金澤秀子
    • 学会等名
      第81回分析化学討論会
  • [学会発表] 幹細胞精製を目的とした温度応答性細胞分離カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子
    • 学会等名
      第81回分析化学討論会
  • [学会発表] 抗がん剤送達の効率化のための温度・pH 応答性高分子ミセルの作製2021

    • 著者名/発表者名
      相原佳真, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第37回日本DDS学会学術集会
  • [学会発表] 温度応答性高分子を用いたアミノ酸トランスポーター標的リポソームの開発2021

    • 著者名/発表者名
      有村花音, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第37回日本DDS学会学術集会
  • [学会発表] 幹細胞治療への応用を目的とした細胞分離カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子
    • 学会等名
      第37回日本DDS学会学術集会
  • [学会発表] 温度に応答したアルギニン密度制御による高分子ミセルの細胞内送達2021

    • 著者名/発表者名
      山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第37回日本DDS学会学術集会
  • [学会発表] Development of temperature-responsive anion-exchange chromatography for effective purification of oligonucleotides2021

    • 著者名/発表者名
      Kaichi Yamazaki, Yutaro Maekawa, Hideko Kanazawa, Kenichi Nagase
    • 学会等名
      The 31st International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis (PBA2021)
    • 国際学会
  • [学会発表] Effective temperature-modulated cell separation using polymer brush with cell affinity peptides2021

    • 著者名/発表者名
      Ruka Shimane, Masaki Shimura, Sota Yamada, Hideko Kanazawa, Kenichi Nagase
    • 学会等名
      The 31st International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis (PBA2021)
    • 国際学会
  • [学会発表] Temperature responsive cell separation chromatography for purification of mesenchymal stem cell2021

    • 著者名/発表者名
      Kenichi Nagase, Goro Edatsune, Sota Yamada, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      The 31st International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis (PBA2021)
    • 国際学会
  • [学会発表] Temperature-modulated sample preparation using thermoresponsive spin column2021

    • 著者名/発表者名
      Masakazu Inoue, Yuta Ishizawa, Hideko Kanazawa, Kenichi Nagase
    • 学会等名
      The 31st International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Analysis (PBA2021)
    • 国際学会
  • [学会発表] 温度制御型肝細胞分離システムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      小島直人, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第33回バイオメディカル分析科学シンポジウム (BMAS2021 Kyoto)
  • [学会発表] 温度制御により幹細胞を精製する細胞分離カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子
    • 学会等名
      第33回バイオメディカル分析科学シンポジウム (BMAS2021 Kyoto)
  • [学会発表] 刺激応答性高分子を用いた温度制御型核酸精製法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      山崎開智, 前川祐太朗, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第33回バイオメディカル分析科学シンポジウム (BMAS2021 Kyoto)
  • [学会発表] 温度応答性-カチオン性ブロック共重合体による幹細胞分離法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子
    • 学会等名
      第70回高分子討論会
  • [学会発表] ラベルフリー細胞分離を実現する温度応答性細胞分離カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      岡田明莉, 枝常吾郎, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第65回日本薬学会関東支部大会
  • [学会発表] 温度応答性クロマトグラフィーによる簡便な血中薬物濃度測定法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      髙木光, 西山輝乃, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第65回日本薬学会関東支部大会
  • [学会発表] 温度応答性高分子とイオン性高分子を用いたミックスモードカラム作製2021

    • 著者名/発表者名
      松本光祐, 渡邊真梨亜, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第65回日本薬学会関東支部大会
  • [学会発表] 大山純子, 寺内麻緒莉, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一2021

    • 著者名/発表者名
      化粧品への応用を目的としたリポソーム製剤の開発と機能性評価
    • 学会等名
      第65回日本薬学会関東支部大会
  • [学会発表] 医療現場における血清試料の安全な除タンパクを目指した温度応答性スピンカラムの作製2021

    • 著者名/発表者名
      井上正和, 石澤佑太, 長瀬健一, 金澤秀子
    • 学会等名
      第18回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2020/PPF2021)
  • [学会発表] がん治療を目的としたリガンド結合型温度応答性リポソームの開発2021

    • 著者名/発表者名
      有村花音, 藤條惠, 松浦みなみ, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第18回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2020/PPF2021)
  • [学会発表] 外部温度とpHに応答する抗がん剤デリバリーミセルの開発2021

    • 著者名/発表者名
      相原佳真, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第18回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2020/PPF2021)
  • [学会発表] 温度応答性高分子とアフィニティリガンドを用いたエクソソーム精製法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      山崎開智, 前川祐太朗, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第18回次世代を担う若手のためのフィジカル・ファーマフォーラム (PPF2020/PPF2021)
  • [学会発表] 細胞移植効率化のための血管新生因子徐放ナノ粒子の開発2021

    • 著者名/発表者名
      永岡真凜, 中野雄斗, 山田創太, 鵜頭理恵, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      LIFE2020-2021
  • [学会発表] 細胞接着性ペプチドリガンドと生体適合性高分子を用いた温度制御型細胞分離法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      島根瑠霞, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      日本分析化学会第70年会
  • [学会発表] エクソソーム分離のための温度制御型アフィニティ精製法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      山崎開智, 前川祐太朗, 山田創太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      日本分析化学会第70年会
  • [学会発表] 簡便・安全な血清薬物試料の除タンパクを可能にする温度応答性スピンカラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      井上正和, 石澤佑太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      日本分析化学会第70年会
  • [学会発表] 機能性界面を用いたバイオ医薬品・治療用細胞の革新的分離精製法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一
    • 学会等名
      第5回バイオインダストリー奨励賞講演会
    • 招待講演
  • [学会発表] 血清試料の安全な除タンパクを可能にする温度応答性スピンカラムの作製2021

    • 著者名/発表者名
      井上正和, 石澤佑太, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第32回クロマトグラフィー科学会議 (野田)
  • [学会発表] 温度応答性肝細胞分離カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      松田潤之介, 稲永大夢, 後藤光昭, 赤池敏宏, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第32回クロマトグラフィー科学会議 (野田)
  • [学会発表] 温度制御型ウイルスベクター精製カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      小暮利彦, 北澤 早紀子, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      第32回クロマトグラフィー科学会議 (野田)
  • [学会発表] 温度制御型幹細胞クロマトグラフィーの開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 枝常吾郎, 金澤秀子
    • 学会等名
      第32回クロマトグラフィー科学会議 (野田)
  • [学会発表] 細胞シート積層技術によるヒト骨格筋組織の作製と収縮力測定による機能評価2021

    • 著者名/発表者名
      高橋宏信, 若山暖乃, 長瀬健一, 清水達也
    • 学会等名
      第43回日本バイオマテリアル学会大会
  • [学会発表] 細胞認識ペプチドを用いた温度制御型細胞分離法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 志村昌紀, 島根瑠霞, 金澤 秀子
    • 学会等名
      第43回日本バイオマテリアル学会大会
  • [学会発表] Cell Separation Column using Thermoresponsive Block Copolymer Brush Modified Silica Bead as Packing Materials2021

    • 著者名/発表者名
      Kenichi Nagase, Goro Edatsune, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      8th Asian Biomaterials Congress, (8th ABMC)
    • 国際学会
  • [学会発表] Thermoresponsive ionic copolymer brushes for temperature modulated cell separations2021

    • 著者名/発表者名
      Kenichi Nagase, Naho Uchikawa, Ayumu Ohta, Tadashi Hirotani, Aya Mizutani Akimoto, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      The International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2021 (PacifiChem2021)
    • 国際学会
  • [学会発表] Temperature-modulated cell separation column using thermoresponsive cationic copolymer modified beads2021

    • 著者名/発表者名
      Kenichi Nagase, Daimu Inanaga, Aya Mizutani Akimoto, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      The International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2021 (PacifiChem2021)
    • 国際学会
  • [学会発表] Temperature responsive mixed mode chromatography for effective separation of ionic biomolecules2021

    • 著者名/発表者名
      Kenichi Nagase, Sakiko Kitazawa, Maria Watanabe, Fumihiko Zen, Sota Yamada, Hideko Kanazawa
    • 学会等名
      The International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2021 (PacifiChem2021)
    • 国際学会
  • [学会発表] 温度応答型アデノ随伴ウイルスベクター精製カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      小暮利彦, 北澤 早紀子, 金澤秀子, 長瀬健一
    • 学会等名
      ライフサポート学会 第31回フロンティア講演会
  • [学会発表] 間葉系幹細胞のラベルフリー分離を実現する細胞分離カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一, 枝常吾郎, 金澤秀子
    • 学会等名
      第21回日本再生医療学会総会
  • [学会発表] 創薬研究への応用を目指した細胞シート積層技術によるヒト骨格筋組織モデルの作製2021

    • 著者名/発表者名
      高橋宏信, 若山暖乃, 長瀬健一, 清水達也
    • 学会等名
      第21回日本再生医療学会総会
  • [学会発表] 温度応答性ウイルスベクター精製カラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      小暮利彦、北澤早紀子、片山和浩、金澤秀子、花岡健二郎、長瀬健一
    • 学会等名
      日本薬学会第142年会 (名古屋)
  • [学会発表] アルギニン密度制御による高分子ミセルの温度応答性ターゲティング2021

    • 著者名/発表者名
      鈴木杏奈、山田創太、佐々木栄太、長瀬健一、花岡健二郎
    • 学会等名
      日本薬学会第142年会 (名古屋)
  • [学会発表] 複合的な相互作用を制御する温度応答性ミックスモードカラムの開発2021

    • 著者名/発表者名
      長瀬健一、渡邊真梨亜、善 文比古、松本光祐、花岡健二郎、金澤秀子
    • 学会等名
      日本薬学会第142年会 (名古屋)
  • [学会発表] 温度応答性肝細胞分離クロマトグラフィーの開発2021

    • 著者名/発表者名
      松田潤之介、稲永大夢、後藤光昭、赤池敏宏、金澤秀子、花岡健二郎、長瀬健一
    • 学会等名
      日本薬学会第142年会 (名古屋)

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公開日: 2022-12-28  

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