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2019 年度 実績報告書

単一微小液滴が引き起こす光の量子効果を用いたタンパク質構造ゆらぎの一分子測定

研究課題

研究課題/領域番号 19H02678
研究機関大阪市立大学

研究代表者

迫田 憲治  大阪市立大学, 大学院理学研究科, 准教授 (80346767)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2022-03-31
キーワード微小液滴 / イオントラップ / 蛍光測定
研究実績の概要

生体関連分子の構造ゆらぎを十分な時空間分解能で観測することは,「生体分子の機能」を理解するための第一歩になるはずである。蛍光プローブ分子を用いた蛍光顕微分光は生体分子の構造変化を追跡する有力な手段であるが,その時間分解能は蛍光検出感度で決まる。一方,大気中に空間捕捉された単一微小液滴は,微小な光共振器として振る舞うことが知られており,この性質を利用することによって,溶存分子が放出する蛍光を高感度に検出できると考えられる。しかしながら,大気中に空間捕捉された微小液滴の場合,溶媒の蒸発による液滴径の変化が顕著であるため,液滴を捕捉するチャンバー内の湿度および温度の管理が必須である。本年度の研究では,液滴を長時間,安定に空間捕捉するための液滴捕捉チャンバーを独自に開発した。
今回開発した液滴捕捉チャンバーは,独自構造をもった液滴捕捉電極と断熱容器から構成されている。捕捉電極は三個の特徴的な電極からなり,両端がEndcap電極,中央の箱型の電極がRing電極である。Ring電極に数百Hzの変調電圧を印加することで捕捉電場を形成する。捕捉した液滴にRing電極に空けた穴から励起光を当て,励起光と直交方向に設置した対物レンズを用いて液滴からの蛍光を捕集する。一方,断熱容器本体の壁は内部が中空になっており,断熱材を充填することで断熱性能を高める設計にした。また温度調節器内部に恒温槽から液体を循環させることで,チャンバー内部の温度を調節する。そして湿らせた窒素ガスを導入することで,チャンバー内部の湿度を調節する。
実際に製作した液滴捕捉電極と断熱容器を用いて実験を行ったところ,断熱チャンバー内部の温度を下げると,液滴からの溶媒の蒸発が減少することが分かった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

今回開発した液滴捕捉電極と断熱容器を用いて,容器内の温度および湿度管理実験を行ったところ,液滴からの溶媒の蒸発速度は低下したが,設計時に予測した性能には達していないことが判明した。断熱容器内の湿度および温度分布を詳細に調べたところ,容器内の湿度が不均一になっていること,および,湿度の値が想定よりも低いことが分かった。容器内の湿度管理は,水蒸気を含む窒素ガスをフローさせることによって行っているが,容器内の形状が原因で窒素ガスのフローが上手くいっていない可能性が示唆された。研究遂行上,断熱容器内を長時間にわたって高湿度に保つことが必須であるため,断熱容器とそれに設置する液滴捕捉電極の改良が必要となった。

今後の研究の推進方策

今回開発した液滴捕捉電極は,我々が以前から使用してきたエンドキャップトラップ(イオントラップの一種)と比べて大型である。液滴捕捉電極の形状は,液滴捕捉の安定性と蛍光捕集効率の兼ね合いを考慮して決定したが,電極が大型であるがゆえに断熱容器内の窒素ガスの流れに悪影響を及ぼしている可能性が高い。事実,湿度だけでなく,容器内温度も,電極近傍と電極から離れた位置では数℃のギャップが存在する。この問題を解決するため,今後は液滴捕捉電極の形状をエンドキャップトラップに近い構造に変更したうえで液滴の捕捉安定性の評価を行う。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2019

すべて 学会発表 (6件) (うち国際学会 4件、 招待講演 3件)

  • [学会発表] 平行平板型イオントラップとエンドキャップトラップの性能比較2019

    • 著者名/発表者名
      野口昌起,佐野元哉,八ッ橋知幸,迫田憲治
    • 学会等名
      第13回分子科学討論会
  • [学会発表] Performance comparison with a parallel plate iontrap and an endcap iontrap2019

    • 著者名/発表者名
      Masaki Noguchi, Motoya Sano, Tomoyuki Yatsuhashi, Kenji Sakota
    • 学会等名
      International Workshop on Quantum Sensing & Biophotonics 2019
    • 国際学会
  • [学会発表] 改良型平行平板型イオントラップの作製及び性能評価2019

    • 著者名/発表者名
      野口昌起,佐野元哉,八ッ橋知幸,迫田憲治
    • 学会等名
      OCU先端光化学シンポジウム
  • [学会発表] Fluorescence enhancement caused by the excitation light confinement in a single microdroplet2019

    • 著者名/発表者名
      Kenji Sakota
    • 学会等名
      Manchester International Symposium: Highly-excited States and Non-covalent Interactions
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] The cavity mode dependent confinement of excitation light in a single levitated microdroplet2019

    • 著者名/発表者名
      Kenji Sakota
    • 学会等名
      The 23th East Asian Workshop on Chemical Dynamics
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Microscopy of a single levitated microdroplet for biomolecular applications2019

    • 著者名/発表者名
      Kenji Sakota
    • 学会等名
      13th International Symposium on Nanomedicine
    • 国際学会 / 招待講演

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公開日: 2022-12-28  

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