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2020 年度 実績報告書

長鎖ポリアミン生合成系の全容解明とシリカ形成における機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 19H02886
研究機関広島大学

研究代表者

池田 丈  広島大学, 統合生命科学研究科(先), 助教 (10505754)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2022-03-31
キーワード細菌 / ケイ素 / ポリアミン
研究実績の概要

一部の生物は、無機鉱物であるシリカ(SiO2)を細胞内で形成する能力を有する。系統の異なる複数のシリカ形成生物において、多数のアミノ基を有する長鎖ポリアミンがシリカの内部に存在することが報告されている。このことから、長鎖ポリアミンがシリカの形成において重要な役割を果たしていると考えられている。しかし、その生合成経路は未だ不明であり、長鎖ポリアミンの機能を解析する上で大きな障壁となっていた。一方、研究代表者は、シリカを形成する中温性細菌において長鎖ポリアミン合成酵素をコードしていると考えられる遺伝子群を発見した。これまでに行った遺伝子破壊実験や組換え体発現実験などの結果から、これらの遺伝子の配列から予測される機能と実際の実験結果が一致しないことが示唆されている。本研究では、これらの遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を詳細に解析することで、長鎖ポリアミン生合成系の全容を解明することを目的とする。また、得られた知見を基に、シリカ形成における長鎖ポリアミンの機能を解析する。
本研究課題のこれまでの研究において、大腸菌で発現した2種類の組換えタンパク質を組み合わることで、in vitroでの長鎖ポリアミン合成に成功した。本年度の研究では、合成した長鎖ポリアミンの精製法ならびに定量法を確立することに成功した。これによりシリカ重合能について、短鎖のポリアミンと定量的に比較することが可能になった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

酵素反応により合成された長鎖ポリアミンの精製法・定量法の確立に成功するなど、おおむね計画通りに進展した。

今後の研究の推進方策

これまでの研究によって長鎖ポリアミンを定量することが可能となり、シリカ重合能について短鎖のポリアミンとの定量的な比較が可能となった。シリカ形成における長鎖ポリアミンの機能をより詳細に解析するため、長鎖ポリアミンを鎖長ごとに分離し、ポリアミンの鎖長とシリカ重合能の関係について評価を試みる予定である。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2021 2020

すべて 学会発表 (3件)

  • [学会発表] 固体材料表面と生体分子の相互作用の解析とバイオ融合マテリアル開発への応用2021

    • 著者名/発表者名
      池田 丈
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部第58回講演会(例会)
  • [学会発表] 固体材料表面と生体分子の相互作用の解析とバイオ融合マテリアル開発への応用2021

    • 著者名/発表者名
      池田 丈
    • 学会等名
      日本農芸化学会2021年度大会
  • [学会発表] Bacillus cereusが芽胞表層に形成するシリカ層の内部から発見された長鎖ポリアミンの解析:合成酵素の発見とその局在解析2020

    • 著者名/発表者名
      池田 丈, 廣田隆一, 黒田章夫
    • 学会等名
      日本生物工学会西日本支部大会2020 (第5回講演会)

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公開日: 2021-12-27  

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