MHC クラスII DRB3*0902保有牛における牛白血病抵抗性機序

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19H03128
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 乗峰 潤三 宮崎大学, 農学部, 教授 (30627667)
• 研究分担者: 佐藤 克明 宮崎大学, 医学部, 教授 (40301147) ; 今内 覚 北海道大学, 獣医学研究院, 教授 (40396304)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: 牛伝染性リンパ腫症 / bovine leukemia virus / MHCクラスII / DRB3*009:02 / 抵抗性 / アリル / ヘルパーT細胞

研究実績の概要

牛伝染性リンパ腫症（旧名：牛白血病)はレトロウイルス科のBovine Leukemia Virus: BLVの感染により発症する腫瘍性の感染性疾患である。興味深い事に、BLV感染牛の中には、リンパ腫へ進行しない牛群がある事が知られていた。これは、これらの牛群に特有の免疫遺伝子が、BLV感染時おける免疫防御力を高めている事を示唆する。本研究では、牛の獲得免疫に重要な役割を果たすMHCクラスII遺伝子DRB3のうちDRB3*009:02アリルを保有する牛においては、BLV感染後に病態が進行しないことに着目し研究を実施してきた。本課題の特徴は、家畜である牛を対象とした基礎免疫学的研究である事、特に防御免疫に重要な役割を果たす抗原特異的CD4+T細胞（ヘルパーT細胞）の定量化を実現している事である。人工的に作製した、DRB3*009:02分子とBLV抗原が結合した４量体（MHCクラスIIテトラマー）を利用してヘルパーT細胞を定量する事によって、DRB3*009:02分子が果たすBLV感染症免疫防御の役割を明らかにできる。最終年度では、DRB3*009:02を含む様々なMHCクラスIIテトラマーを作製し、BLV実験感染牛を使ってBLV感染後のBLV抗原特異的ヘルパーT細胞の数的変動を解析する予定であった。この実験計画のうちBLV抗原のヘルパーT細胞認識部位（T細胞エピトープ）の同定及びMHCクラスIIの作製には成功した。しかしながら、計画時点では可能であった牛を使った実験施設（北海道）の確保、実験施設への移動・滞在が困難となる事情が発生し、断念する事になった。結論として、牛におけるMHCクラスIIを使った抗原特異的ヘルパーT細胞の定量は、それ自体難しい免疫学的手法であり、それを確立できたことは大きな成果である。今後、本研究において得られた成果を利用して感染実験を実現できる事を望む。

現在までの達成度 (段落)

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of a DRB3*011:01-restricted CD4+ T cell response against bovine respiratory syncytial virus fusion protein (2023)
  • 著者名/発表者名: Kaplan Bryan S.、Hofstetter Amelia R.、McGill Jodi L.、Lippolis John D.、Norimine Junzo、Dassanayake Rohana P.、Sacco Randy E.
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 14 ページ: 1~14
  • DOI: 10.3389/fimmu.2023.1040075
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of droplet digital PCR for quantification of bovine leukemia virus proviral load using unpurified genomic DNA (2023)
  • 著者名/発表者名: Wu Xinyue、Notsu Kousuke、Matsuura Yuichi、Mitoma Shuya、El Daous Hala、Norimine Junzo、Sekiguchi Satoshi
  • 雑誌名: Journal of Virological Methods 巻: 315 ページ: 114706～114706
  • DOI: 10.1016/j.jviromet.2023.114706
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identifying Pathogen and Allele Type Simultaneously in a Single Well Using Droplet Digital PCR (2023)
  • 著者名/発表者名: Notsu Kosuke、El Daous Hala、Mitoma Shuya、Wu Xinyue、Norimine Junzo、Sekiguchi Satoshi
  • 雑誌名: mSphere 巻: 8 ページ: 1~13
  • DOI: 10.1128/msphere.00493-22
  • 査読あり
• [雑誌論文] A survey of bovine leukemia virus resistant bovine leukocyte antigen (<i>BoLA</i>)<i>-DRB3*009:02</i> allele-carrying Japanese Black cattle in two prefectures in Japan (2022)
  • 著者名/発表者名: NOTSU Kosuke、INOUE Yoshinobu、MASUDA Tsuneyuki、INOUE Masahiro、MITOMA Shuya、WU Xinyue、NORIMINE Junzo、SEKIGUCHI Satoshi
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Medical Science 巻: 84 ページ: 1457～1460
  • DOI: 10.1292/jvms.22-0285
  • 査読あり