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昨年度の研究で浮上してきた、ブタ初期胚ではCyclin AがCyclin Bに代わってMPFとして直接作用するという可能性について検証を行った。Cyclin B1、B2、A2のアンチセンスRNAまたはmRNAのブタ初期胚への顕微注入により、これらの人為的発現制御の卵割への影響を調べた。Cyclin A2の発現抑制は卵割率の有意な低下を示し十分な再現性が得られた。逆に過剰発現では、多くの胚が分裂中期像を示して停止した。この結果は高濃度のCyclin A2が分解能を凌駕し、MPFとして作用したCDK1/Cyclin A2が分裂中期を誘導したと考えられ、Cyclin AがMPFとして働くことを支持する結果である。一方、Cyclin B1とCyclin B2を発現抑制した場合の卵割率はコントロールとほとんど差が無く、Cyclin BがMPFとして作用しないことを示唆する結果であった。Cyclin Aの抑制がS期抑制の結果として第一卵割を抑制している可能性に関しては、Ｓ期のDNA合成の指標となるBrdUの取り込みにより確認した。その結果、Cyclin A2抑制区のBrdUの陽性率は94%と対照区の70%よりむしろ高かった。染色強度は対照区の約80%と若干低いもののDNA合成は十分起こっていると考えられ、Cyclin A2抑制がＳ期進行を妨げ第一卵割を抑制したという可能性は否定される。
以上、本実験結果はいずれもブタ初期胚ではCyclin AがCyclin Bに代わってCDK1複合体を形成しMPFとして直接作用する可能性を支持している。従来、卵母細胞や体細胞でMPFと考えられてきたCDK1/Cyclin B複合体が、ブタ初期胚では重要な役割を持たない可能性が示唆されたのは驚くべきことである。今後のさらなる研究確認が必要ではあるが、この示唆が得られたことは本研究の大きな成果である。
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