研究課題
癌転移開始細胞(以下MICと略す)は、原発癌に巣喰う微量な細胞集団で、癌転移を積極的に仕掛ける。MICの制圧が癌転移抑止に必須であるが、MICの特異抗原が不明であるなど、未解明な点が多い。我々はスキルス胃癌患者より細胞株を樹立し、独自にMIC実験モデルを立ち上げてきた。その解析により「MICで高発現するZIP10という分子が、癌転移と密接な関係にある」という知見を得てきた。この成果を基に以下の3点を目的に掲げる。すなわち、MICに高発現するZIP10をゲノム編集でKOし、①癌転移におけるZIP10の生物学的意義を解明、②ZIP10がin vivoで癌転移抑止の分子標的になり得るか否か、③患者血中循環癌細胞を対象にZIP10が癌転移のマーカーになり得るか否か、以上3点の証明を目的とする。今年度の検討では、樹立したスキルス胃癌株から単離したMICで高発現するZIP10をゲノム編集でKOする実験を中心に行った。数種のガイドRNAを設計後、ゲノム編集ベクターに組み込む実験を行った。その結果、ゲノム編集にて、有効性を示すガイドRNA2個を見出すことに成功した(ゲノム編集手法にて、ZIP10をKO可能なガイドRNA塩基配列の決定)。現在、ZIP10をKOしたスキルス胃癌MIC株を用いて、in vitroにおけるフェノタイプ(細胞の形態変化・EMTマーカー・ステムネスマーカー・増殖能と浸潤能・抗癌剤耐性能など)を解析しているところである。また次年度の実験で、細胞内の亜鉛含量についても解析する予定である。
2: おおむね順調に進展している
本年度において、おおよそ研究実施計画書に記載した実験をひとつずつ行った。課題の初年度ということもあり、試行錯誤が必要な実験もあったが、実験自体を軌道に乗せることができた。
次年度においても、研究実施計画書に記載した実験内容になるべく従って、実験を進めていく予定である。
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