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2021 年度 実績報告書

ハイスループット単一分子分光による光合成タンパク質のassembly中間体の探索

研究課題

研究課題/領域番号 19H03187
研究機関東北大学

研究代表者

柴田 穣  東北大学, 理学研究科, 准教授 (20300832)

研究分担者 高橋 裕一郎  岡山大学, 異分野基礎科学研究所, 教授 (50183447)
鞆 達也  東京理科大学, 教養教育研究院神楽坂キャンパス教養部, 教授 (60300886)
研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2022-03-31
キーワード単一分子分光 / 時間分解蛍光測定 / エネルギー移動 / 過渡的中間体 / 光化学系I
研究実績の概要

X線結晶構造解析および進展著しいクライオ電子顕微鏡技術による解析から、光合成タンパク質の構造が原子分解能で明らかとなり、その機能発現機構に対する理解は飛躍的に蓄積している。このような状況下で残された課題は、100を超える色素分子がポリペプチド鎖の所定の位置に正しく結合し、さらに10を超える色素-ポリペプチド鎖複合体が合体して大きな機能性複合体が形成される機構を明らかにすることである。この課題に挑戦するにあたり、光合成の光化学系タンパク質の一つである光化学系I(Photosystem I: PSI)のAssembly中間体の単離に成功している岡山大学の高橋裕一郎教授グループとの共同研究を行った。高橋教授グループは、成熟構造のPSI蓄積に必須の因子であるYcf3およびYcf4タンパク質を含むAssembly中間体の単離に初めて成功している。Ycf3は、PSI assembly過程のより初期に働く因子であると考えられており、一方Ycf4はよりAssemblyが進んだ段階で働くものと考えられている。どちらのサンプルも希少にしか得られず、これまで分光学的な解析が実現されていなかった。我々は、非常に少量のサンプルで実施可能な単一分子分光法を行うことで、初めてこれらの因子の蛍光スペクトルの測定に成功した。その結果、特にYcf3は各分子毎に大きく異なるスペクトルを示すことが明らかになった。これは、未成熟なPSI assembly中間体のさまざまな状態を初めて分離して測定した画期的な成果である。一方、Ycf4については、十分な希釈を行わない場合に凝集体として観測されることが明らかとなった。このことは、Ycf4がPSI assemblyに関係する多くの複合体を集積して巨大な複合体を形成し、迅速なassemblyを補助している様を反映していると考えている。

現在までの達成度 (段落)

令和3年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和3年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (11件)

すべて 2021 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (8件) (うち国際学会 1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] High-Speed Excitation-Spectral Microscopy Uncovers In Situ Rearrangement of Light-Harvesting Apparatus in Chlamydomonas during State Transitions at Submicron Precision2021

    • 著者名/発表者名
      Xian Jun Zhang, Yuki Fujita, Ryutaro Tokutsu, Jun Minagawa, Shen Ye and Yutaka Shibata
    • 雑誌名

      Plant Cell Physiology

      巻: 62 ページ: 872-882

    • DOI

      10.1093/pcp/pcab047

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 単一分子蛍光分光で見える光合成アンテナ系の揺らぐエネルギー移動経路2021

    • 著者名/発表者名
      柴田 穣
    • 雑誌名

      生物物理

      巻: 61 ページ: 23-26

    • DOI

      10.2142/biophys.61.023

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Excitation-spectral microscopy uncovers in-situ rearrangement of LHCII in Chlamydomonas during state transitions2021

    • 著者名/発表者名
      張 先駿, 藤田 祐輝, 得津 隆太郎, 皆川 純, 叶 深, 柴田 穣
    • 学会等名
      第11回日本光合成学会年会
  • [学会発表] Excitation-spectral microscopy uncovers in-situ rearrangement of LHCII in Chlamydomonas during state transition2021

    • 著者名/発表者名
      張 先駿, 藤田 祐輝, 得津 隆太郎, 皆川 純, 叶 深, 柴田 穣
    • 学会等名
      第28回光合成セミナー2021: 反応中心と色素系の多様性
  • [学会発表] 光化学系Iassembly中間体の時間分解蛍光および単一分子分光解析2021

    • 著者名/発表者名
      金田直也, Sreedhar Nellaepalli, 高橋裕一郎, 柴田穣
    • 学会等名
      第28回光合成セミナー2021: 反応中心と色素系の多様性
  • [学会発表] 二次元蛍光寿命相関分光による光化学系Iタンパク質の単一分子電子移動速度の測定2021

    • 著者名/発表者名
      谷口凜,篠田稔行,鞆達也,叶深,近藤徹,柴田穣
    • 学会等名
      第15回分子科学討論会
  • [学会発表] 光化学系I assembly中間体の単粒子分光と時間分解蛍光解析2021

    • 著者名/発表者名
      金田直也, Sreedhar Nellaepalli, 高橋裕一郎, 叶深, 柴田穣
    • 学会等名
      2021年度 化学系学協会東北大会
  • [学会発表] ストリークカメラを検出器とした細胞内局所での時間分解顕微蛍光分光2021

    • 著者名/発表者名
      藤田 祐輝,張 先駿, 金田 直也,柴田 穣
    • 学会等名
      第59回日本生物物理学会年会
  • [学会発表] 励起スペクトル顕微鏡と超解像イメージングで明らかになったステート遷移におけるチラコイ ド膜の不規則な構造変化2021

    • 著者名/発表者名
      張 先駿, 藤田 祐輝, 金田 直也, 得津 隆太郎, 皆川 純, 叶 深, 柴田 穣
    • 学会等名
      第59回日本生物物理学会年会
  • [学会発表] Uphill energy transfer mechanism for photosynthesis in the Antarctic alga2021

    • 著者名/発表者名
      Makiko Kosugi, Masato Kawasaki, Yutaka Shibata, Kojiro Hara, Shinichi Takaichi, Toshio Moriya, Naruhiko Adachi, Yasuhiro Kamei, Yasuhiro Kashino, Sakae Kudoh, Hiroyuki Koike, Toshiya Senda
    • 学会等名
      The 12th Symposium on Polar Science
    • 国際学会
  • [備考] 光で単一分子の挙動を測る

    • URL

      http://sub.web.tohoku.ac.jp/orgphys/content/files/research_Shibata.pdf

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公開日: 2022-12-28  

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