肝炎ウイルス制御後肝発癌におけるプレシジョンメディシンのための基盤的研究

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19H03638
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 榎本 信幸 山梨大学, 大学院総合研究部, 教授 (20251530)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: 肝炎ウイルス制御後 / 原発性肝癌 / HCV / HBV / 次世代シークエンサー / 自然免疫 / ウイルスゲノム / 宿主遺伝子

研究実績の概要

ウイルス制御後肝癌における炎症・インターフェロン誘導遺伝子群の解明：ウイルス制御前後におけるインターフェロン関連分子の発現状況について検討、まず血中IFN-γシグナルの下流分子IP-10に着目して、ウイルス制御前後の血液中の発現状況について検討した。C型慢性肝炎において、全体として制御前血液中濃度は上昇し制御後は低下するが、非代償性肝硬変において制御前IP-10濃度はむしろ低下し、制御後は上昇傾向となること、上昇症例では肝病態が改善しにくい可能性を見出した。現在発癌を含めた病態意義についてさらに検討中である。
ウイルス制御後肝癌における宿主遺伝子群の解析：レーザーマイクロダイセクションによる精密な肝癌病変組織採取後、次世代シークエンスを用いた宿主ゲノムの変異deep sequencing解析により、発癌に関連する宿主因子の特徴を検討、ウイルス排除後肝癌ではhTERTプロモーターC228T変異頻度が特に高いことを明らかとした。また成因に拘わらず原発性肝癌組織におけるhTERTプロモーター変異を持つ細胞集団はおおよそ3割程度であり、肝癌の進展に拘わらずその比率はおおよそ一定であることを見出した。また本結果をリキッドバイオプシーに応用し、画像検査にて推定される腫瘍ボリュームは血中で検出されるhTERTプロモーター変異量と相関することを明らかとし、hTERTプロモーターC228T変異は腫瘍マーカーとして有望である可能性を示した。
ウイルス制御後肝癌におけるウイルスゲノムの解析：治療前HCVウイルスゲノムのゲノムに対して、nanopore1分子シークエンサー（第三世代シークエンサー）を導入し、rolling circle amplification法を加えることにより、をこれまでにない精度でウイルスゲノムの直列配列情報と、その混在状態解析が可能となるプラットフォームを構築した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本研究は、ウイルス制御後においてなお肝発癌の生じるメカニズムをウイルスゲノムと宿主因子の双方から次世代シークエンサーで解明、さらにバイオマーカーを開発してゆくことを目的としている。2019年度は自然免疫分子の動態、癌遺伝子のリキッドバイオプシー、ウイルスゲノムの解析法の構築等についていくつかの新たな知見が得られた。

今後の研究の推進方策

2019年度の研究成果を基盤として、適切な症例の積み重ねにより、研究の方向性を軌道修正しつつ、ウイルス制御後肝発癌メカニズムの解明、さらにバイオマーカーを開発につなげてゆく。

研究成果

• [雑誌論文] MRI-based risk factors of hepatocellular carcinoma in patients with chronic liver disease: A prospective observational study. (2020)
  • 著者名/発表者名: Shimizu T, Motosugi U, Komatsu N, Ichikawa S, Inoue T, Onishi H, Enomoto N
  • 雑誌名: J Magn Reson Imaging 巻: 51 ページ: 389-396
  • DOI: 10.1002/jmri.26797.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comprehensive genetic analysis of cholangiolocellular carcinoma with a coexistent hepatocellular carcinoma-like area and metachronous hepatocellular carcinoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kawai-Kitahata F, Asahina Y, Kaneko S, Tsuchiya J, Sato A, Miyoshi M, Tsunoda T, Inoue-Shinomiya E, Murakawa M, Nitta S, Itsui Y, Nakagawa M, Azuma S, Kakinuma S, Tanabe M, Sugawara E, Takemoto A, Ojima H, Sakamoto M, Muraoka M, Takano S, Maekawa S, Enomoto N, Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 49 ページ: 1466-1474
  • DOI: 10.1111/hepr.13403.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Baseline and Early Predictors of Good Patient Candidates for Second-Line after Sorafenib Treatment in Unresectable Hepatocellular Carcinoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Takada H, Kurosaki M, Tsuchiya K, Komiyama Y, Itakura J, Takahashi Y, Nakanishi H, Yasui Y, Tamaki N, Maeyashiki C, Kaneko S, Takaura K, Higuchi M, Okada M, Wang W, Osawa L, Sekiguchi S, Hayakawa Y, Yamashita K, Enomoto N, Izumi N
  • 雑誌名: Cancers (Basel) 巻: 11(9) ページ: E1256
  • DOI: 10.3390/cancers11091256.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Wisteria floribunda agglutinin-positive mac-2 binding protein as an age-independent fibrosis marker in nonalcoholic fatty liver disease. (2019)
  • 著者名/発表者名: Tamaki N, Higuchi M, Kurosaki M, Kirino S, Osawa L, Watakabe K, Wang W, Okada M, Shimizu T, Takaura K, Takada H, Kaneko S, Yasui Y, Tsuchiya K, Nakanishi H, Itakura J, Takahashi Y, Enomoto N, Izumi N
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 9(1) ページ: 10109
  • DOI: 10.1038/s41598-019-46172-1.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Risk assessment of hepatocellular carcinoma development by magnetic resonance elastography in chronic hepatitis C patients who achieved sustained virological responses by direct-acting antivirals. (2019)
  • 著者名/発表者名: Tamaki N, Higuchi M, Kurosaki M, Kirino S, Osawa L, Watakabe K, Wang W, Okada M, Shimizu T, Takaura K, Takada H, Kaneko S, Yasui Y, Tsuchiya K, Nakanishi H, Itakura J, Takahashi Y, Enomoto N, Izumi N
  • 雑誌名: J Viral Hepat 巻: 26(7) ページ: 893-899
  • DOI: 10.1111/jvh.13103.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sorafenib-Regorafenib Sequential Therapy in Japanese Patients with Unresectable Hepatocellular Carcinoma-Relative Dose Intensity and Post-Regorafenib Therapies in Real World Practice. (2019)
  • 著者名/発表者名: Wang W, Tsuchiya K, Kurosaki M, Yasui Y, Inada K, Kirino S, Yamashita K, Sekiguchi S, Hayakawa Y, Osawa L, Okada M, Higuchi M, Takaura K, Maeyashiki C, Kaneko S, Tamaki N, Nakanishi H, Itakura J, Takahashi Y, Asahina Y, Enomoto N, Izumi N
  • 雑誌名: Cancers (Basel) 巻: 11(10) ページ: E1517
  • DOI: 10.3390/cancers11101517.
  • 査読あり
• [学会発表] 非代償性肝硬変・肝癌合併症例におけるHCVウイルスゲノムの検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 前川 伸哉，松田 秀哉，榎本 信幸
  • 学会等名: 第23回 日本肝臓学会大会
• [学会発表] DAA-SVR 後肝発癌，非代償性肝硬変症例における HCV ウイルスゲノムの検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 前川 伸哉 松田秀哉 榎本信幸
  • 学会等名: 第55回 日本肝臓学会総会
• [学会発表] The role of HCV genome and IL28B SNPs in the development of hepatocellular carcinoma after achieving viral elimination following interferon-free therapy. (2019)
  • 著者名/発表者名: Shinya Maekawa, Shuya Matsuda, Masaru Muraoka, Yuichiro Suzuki, Ryo Katoh, Yasuyuki Komiyama, Natsuko Nakakuki, Akihisa Tatsumi, Yuichiro Suzuki, Yasuhiro Nakayama, Taisuke Inoue, Nobuyuki Enomoto
  • 学会等名: AASLD
  • 国際学会
• [学会発表] 抗ウイルス治療後の肝発癌におけるウイルスゲノム関与の検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 前川 伸哉，佐藤 光明，榎本 信幸
  • 学会等名: 第105回 日本消化器病学会総会
• [学会発表] DAA による SVR 後の HCC の動向とリスク因子の検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 佐藤 光明，前川 伸哉，榎本 信幸
  • 学会等名: 第105回 日本消化器病学会総会