| 研究課題/領域番号 |
19H03846
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| 研究機関 | 筑波大学 |
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研究代表者 |
柳川 徹 筑波大学, 医学医療系, 教授 (10312852)
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| 研究分担者 |
田渕 克彦 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (20546767)
蕨 栄治 筑波大学, 医学医療系, 講師 (70396612)
山縣 憲司 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (00420084)
内田 文彦 筑波大学, 医学医療系, 講師 (70736008)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | p62 / シャトリング / 口腔がん |
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| 研究実績の概要 |
I. 基礎的探求として、1．in vitroの解析：前年度までに制作したNES（NES: Nuclear export signal）とNLS（NLS: nuclear localization signal）配列にゲノム編集で変異を挿入したp62 NES MUT、p62 NLS MUTのノックインマウス2種類からMEF細胞を樹立し、それぞれdNES homo MEF、dNLS homo MEFとしてp62の細胞内局在を共焦点レーザー顕微鏡で調べた。通常状態ではdNES homo MEFはp62が核に蓄積しユビキチン化タンパク凝集体の形成を認めたが、dNLS homo MEFと野生型では核への集積は見られなかった。一方、レプトマイシンB（LMB）処理で核排出の機能を止めたところ、dNLS homo MEFでは核へのp62の集積が認められなかった。
２．in vivoの解析：前年度までに完成させたp62 NES MUT、p62 NLS MUTノックインマウスの表現型を解析したところp62 NLS MUTマウスは正常に成育したが、p62 NES MUTマウスは出生直後から体重減少を有意に認め7週齢頃で致死となった。p62 NES MUTマウスでは腎臓の萎縮を認め、血液・生化学的検査によりBUN、Creの上昇を認めた。病理学的に検討したところ6-7週齢でポドサイトに変異を認めていることが解った。以上よりp62の核内集積は生体内では基底膜との接合の異常に関連することが推察された。
II. 臨床的探索としては、前年度までにほぼ解析が終了し、データのまとめを行った。収集した口腔白板症患者病理および臨床データとp62の局在を3つのパターン（核内集積、凝集、細胞質内集積）に分類してp62の局在のと上皮異形と関連を検討したところ、臨床標本ではp62の核内集積と上皮異型と関連性が示された。
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| 現在までの達成度 (段落) |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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