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未分化大細胞リンパ腫の原因遺伝子産物である融合型チロシンキナーゼNPM-ALKは、細胞質だけでなく核小体にも局在するが、核小体に局在するNPM-ALKの機能は不明である。これまでに私は、NPM-ALKがキナーゼ活性に依存して、核小体に局在することを見出した。さらに、核小体におけるNPM-ALKの結合分子として、リボソームRNA生合成に関与する分子であるEbna1bp2 (EBP2) を同定した。本研究では、NPM-ALKによる形質転換におけるEBP2の役割を解析し、核小体に局在するNPM-ALKの機能を明らかにすることを目指した。
抗pY抗体を用いたIP-IBにより、NPM-ALKがEBP2のチロシン残基をリン酸化することが示唆された。RNA干渉法によるEBP2のノックダウンは、NPM-ALK発現細胞の細胞周期をG0/G1期で停止させ、増殖を抑制した。さらに、EBP2のノックダウンにより、p53の活性化が誘導されることを見出した。EBP2のp53活性制御機構を明らかにするために、まず、EBP2がNPM-ALKによるシグナル伝達に及ぼす影響を検討した。NPM-ALK発現細胞において、EBP2のノックダウンによりAktのリン酸化が亢進することを見出し、Aktが過剰に活性化していることが示唆された。Akt阻害剤GDC-0068およびAktの下流分子であるmTORC1の阻害剤Rapamycinを用いた解析により、EBP2のノックダウンによるp53の活性化は、AktやmTORC1を介していることが明らかとなった。したがって、核小体に局在するNPM-ALKは、EBP2と相互作用することで、Akt-mTORC1経路の過剰な活性化を抑制し、p53の活性を負に制御することが示唆された。
以上の成果は、これまで不明であった核小体NPM-ALKの機能の理解を大幅に進めるものであると考えられる。
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